痛经灵颗粒质量标准探究.docVIP

痛经灵颗粒质量标准探究摘 要：目的：对痛经灵颗粒进行质量标准研究。方法：采用薄层色谱法对痛经灵颗粒进行定性鉴别；采用高效液相色谱法对痛经灵颗粒中的丹酚酸B进行含量测定。结果：丹酚酸B的线性范围分别为0.264～1.584g，平均回收率为100.65%。结论：方法可行、重复性好，能有效地控制痛经灵颗粒的质量。 关键词：痛经灵颗粒；质量标准 中图分类号：R286.0 文献标识码：A 文章编号：1673-2197(2008)04-034-04 痛经灵颗粒为《中华人民共和国卫生部药品标准剂》第15册收载品种[1]。功能与主治为活血化瘀，理气止痛；用于气滞血瘀所致痛经。原质量标准中只收载了两个显色沉淀鉴别反应，无薄层鉴别项目，无含量测定项目，不利于药品质量控制。我们经过研究，增加了丹参、赤芍及元胡的薄层鉴别项目，并增加了高效液相色谱法测定处方中丹酚酸B的含量项目，以对原质量标准进行提高，进一步有效控制痛经灵颗粒产品质量。 1 仪器和材料 1.1 试验仪器 P200Ⅱ高效液相色谱仪：大连依利特科学仪器有限公司。 1.2 药品与试剂 对照品及对照药材购于中国药品生物制品检定所；所用试剂均为分析纯或色谱纯；痛经灵颗粒(自制)。 2 实验方法和结果 2.1 定性鉴别[2] 2.1.1 丹参的薄层色谱鉴别 取本品3g，加水40ml使溶解，置分液漏斗中，加(1→2)盐酸溶液5ml，用乙酸乙酯振摇提取4次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加75%甲醇使溶解并定容至2ml，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加75%甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。按处方取不含丹参的其它药材照本品制备工艺和供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述供试品溶液和阴性对照溶液各6μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板(以等量4%磷酸氢二钠溶液与0.4%羧甲基纤维素钠溶液的混合溶液为粘合剂制备)上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开、取出、晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；阴性无干扰。用连续生产20060102批中试样品进行验证，结果均检出了丹酚酸B，如图1。此法简单、灵敏度高、重现性好、专属性强。 1，2，3为三批样品；4为丹酚酸B对照品； 5为缺丹参的阴性样品 图1 痛经灵颗粒中丹参的TLC(荧光) 2.1.2 赤芍的薄层色谱鉴别 取本品10g，研细，加70%乙醇100ml，超声处理 30win，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次30ml，弃去水液，正丁醇液蒸至约1ml，加中性氧化铝2g，在水浴上拌匀，干燥，装入中性氧化铝小柱(100～200目，2g，内径10～15mm)上，用乙酸乙酯-甲醇(1∶1)混合溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，上清液作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每 1ml含 2mg的溶液，作为对照品溶液。按处方取不含赤芍的其它药材照本品制备工艺和供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述三种溶液各 10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5%香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点；阴性无干扰。如图2。此法简单、灵敏度高、重现性好、专属性强。 1，2，3为三批样品；4为芍药苷对照品；5为缺赤芍的阴性样品 图2 痛经灵颗粒中赤芍的TLC1(日光) 2.1.3 元胡的薄层色谱鉴别 取本品10g，研细，加水20ml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚提取3 次，每次30ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。按处方取不含元胡的其它药材照本品制备工艺和供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述供试品溶液和阴性对照溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一用1%氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以正己烷-三氯甲烷-甲醇(7.5∶4∶1) 为展开剂，置以展开剂预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏