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医学微生物学第三章消毒灭菌与实验室生物安全
第三章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全 第一节 消毒灭菌的常用术语 灭菌: 杀死物体上所有微生物的方法。 消毒:杀死物体上或环境中的病原微生物的方法, 并不一定 能杀死含芽胞的细菌或非病原微生 物。 消毒剂----用于消毒的药品。 防腐:防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。 清洁:通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量 的过程。 无菌:无活菌存在。 无菌操作:防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。 第二节 消毒灭菌的方法 (一)热力灭菌法 高温对细菌有明显的致死作用--- 蛋白质变性;核酸断裂。 有干热灭菌和湿热灭菌两大类,在同一温度下,后者比前者的效力大。 *湿热中菌体蛋白较易凝固。 *湿热的穿透力比干热大。 *湿热的蒸汽有潜热存在。 干热灭菌 干热的杀菌作用是通过脱水、干燥 和大分子变性。 1.焚烧法:直接点燃或在焚烧炉内焚烧。是一种彻底的灭 菌方法。 适用于废弃物品或动物尸体。 2.烧灼法:直接用火焰灭菌。 适用于接种环,试管口等的灭菌。 3.干烤法:将物品置干烤箱内,加热至160~170℃ ,2h。 适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。 4.红外线:利用电磁波的热效应灭菌。1~10?m波长的热 效应最强。适用于医疗器械的灭菌。 湿热灭菌 1.巴氏消毒法:用较低温度杀灭液体中的病原 微生物或特 定的微生物,而仍保持物品中所需的不耐 热成分不被破坏的消毒方法。 61.1~62.8℃ ,30min; 71.7 ℃ ,15~30s 用于牛乳制品、酒类等的消毒。 2.煮沸法: 100 ℃ 水浴,30min。食具、刀剪等消毒。 3.流动蒸气消毒法: 100 ℃ 汽浴,30min。 4.间歇蒸汽灭菌法: 100 ℃ 汽浴,30min/次。 5.高压蒸汽灭菌法:121.3 ℃ 汽浴(103.4kPa),15~20min。 培养基、生理盐水、手术敷料等 耐高温、耐湿物品的灭菌。 (二)辐射杀菌法 紫外线杀菌 波长200~300nm的紫外线有杀菌作用, 其中以265~266nm最强。 杀菌机制:形成T T,干扰DNA的复制与转录。 杀菌作用特点:穿透力弱,表面消毒。 适用范围:手术室、传染病房、细菌实验室 的空气消毒,或不耐热物品的表面消毒。 电离辐射:高速电子、X射线、 γ射线等。 杀菌机制:产生游离基,破坏DNA。 应用范围:一次性医用塑料制品;食品。 微波:波长为1mm到1m左右的电磁波,可穿透 玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质,不能 穿透金属表面。 检验室用品、非金属器械、无菌病室 的食品用具、药杯及其它用品的消毒。 (三)滤过除菌法 用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,以达到无菌的目的。 (四)干燥与低温抑菌法 干燥可使菌体内的水分逸出,使细菌生命 活动停止。 低温可使细菌的新陈代谢减慢,影响细菌 的生长。 冷冻真空干燥法 一、化学消毒剂的杀菌机制 ? 促进菌体蛋白质变性或凝固。 如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类等。 ? 干扰细菌的酶系统和代谢。 如氧化剂、重金属盐类。 ? 损伤菌细胞膜,降低菌细胞的表面张力并增 加其通透性,胞外液体内渗,致使细胞破裂。 如酚类表面活性剂、脂溶剂等。 二、消毒剂的主要种类 酚类—石炭
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