TSA联合基因工程腺病毒H101治疗人食管癌裸鼠皮下移植瘤的研究.doc

TSA联合基因工程腺病毒 H101治疗人食管癌裸鼠皮下移植瘤的研究 冯婷1刘霞1 董子明#1 #通讯作者：男 54岁 教授 博士研究生导师 研究方向：病理与病理生理学 Email：dongziming@zzu.edu.cn （1郑州大学基础医学院病理生理教研室 河南 郑州 450052） 摘要 目的：研究TSA药物对基因工程腺病毒 H101杀伤食管癌 EC9706细胞作用的影响，探讨HDAC抑制剂在腺病毒载体基因治疗中应用的可能性和作用机制。方法：①先成瘤后治疗组，构建裸鼠食管癌移植瘤模型，待肿瘤长出1W后，分组：TSA治疗组（瘤内注射1.0μmol/LTSA /只/次），H101治疗组（瘤内注射50×108 vp/d），TSA联合H101治疗组即先注射TSA，第二天注射H101，注射剂量同上。另设空白对照组，以上治疗持续两周，治疗结束取瘤组织检测。②先处理后成瘤组分别采用浓度为4.0μmol/LTSA体外处理EC906细胞48h，浓度200×108 vp/dH101处理EC9706细胞48h，及二者联合处理EC9706细胞48h，同样设置空白对照组，将处理后的细胞种植于裸鼠皮下构建裸鼠食管癌移植瘤模型。待瘤体长出2周后，取瘤组织用 Real Time PCR、Western-bioting和免疫组化法检测 CAR在移植瘤中的表达，测量肿瘤体积。结果：无论是先处理后成瘤组还是先成瘤后治疗组，TSA组和TSA联合H101治疗组均可上调裸鼠食管癌移植瘤组织中CAR蛋白的表达，相比与对照组和H101治疗组均有明显差异(P0.05)，但TSA组和TSA联合H101治疗组之间相比差异无显著性(P0.05)。而对人食管癌 EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤大小影响TSA联合H101治疗组与TSA组、H101单独治疗组相比均有明显差异(P0.05), TSA和H101组相比差异无显著性(P0.05)。各治疗组与空白对照组相比，差异均有统计学意义(P0.05)。结论：TSA能增强H101治疗人食管癌裸鼠皮下移植瘤，其作用机制是TSA上调了食管癌CAR蛋白的表达。 关键词：柯萨奇-腺病毒受体（Coxsackie and adenovirus receptor，CAR)；TrichostatinA（TSA)；基因工程腺病毒； EC9706； 裸鼠 [中图分类号]：R735.1；R730.231 [文献标识码]： A TSA combined genetically engineered adenovirus H101for treatment of tumor tissue of nude mice transplanted with human esophageal cancer cells fengting1 liuxia1 dongziming1# Department of Pathophysiology, College of Basic Medical Sciences, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, China [ABSTRACT] Objective：the study is to observe TSA drug for the effect of genetic engineering adenovirus H101 killing esophageal cancer EC9706 cell ,and discuss the action mechanisms and the possible applications of HDAC inhibitor in adenovirus vectors for gene therapy . Methods: ① the first examination is treatment after growing tumour . the examination following is building nude model of transplanted tumor in esophageal cancer ,and grouping when the tumor growing one week .TSA treatment group (injection TSA 1.0μmol/LTSA / only / time);H101 treatment group(injection H101 50 × 108 vp / d); TSA and H101 treatment