乌鸡和家鸡血清成分分析.doc

乌鸡和家鸡的血清成分分析 作者：叶子琦 指导老师：吴明江 学号：11112314134 （温州大学生命与环境学院 11生本） 【摘要】：实验通过邻苯二甲醛法测定血清总胆固醇的含量进行定量测定，通过盐析、透析、醋酸纤维素薄膜电泳法将血清清蛋白与γ-球蛋白进行分离与鉴定，可知血清中有清蛋白、α1、α2、β、γ五种蛋白质，同时我们还对血清中的谷丙转氨酶活性进行鉴定及其活力单位的测定。 【关键词】：血清 胆固醇 清蛋白与γ-球蛋白 谷丙转氨酶 生化分析 Black-bone chicken and chicken serum component analysis Author: Ye Ziqi Instructs teacher: Wu Mingjiang Student ID:11112314134（School of Life and Environmental Sciences, Wenzhou University）tract】: The experiment carries on the quantitative determination through the neighbouring phenyl dimethanal law determination blood serum total cholesterol to the cholesterol content, through the salting out, the dialysis acetyl cellulose thin film electrophoresis carries on the blood serum albumen with gamma - the globulin the separation and the appraisal, may know in the blood serum to have the albumen, α1, α2, beta, gamma five kind of protein, simultaneously we also carry on the appraisal and the vigor units determination to in the blood serum valley third transaminase activeness. 【Key words】 ：Blood serum cholesterol albumen and gamma - globulin valley third transaminase biochemistry analysis 【前言】：血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。血清清蛋白与γ-球蛋白是血清的重要成分，通过实验掌握盐析法分离提纯蛋白质的原理和方法；掌握透析法脱盐与蛋白质浓缩的方法； 掌握凝胶过滤层析的技术方法；掌握利用醋酸纤维素薄膜电泳法分离与鉴定血清清蛋白的原理和方法。谷丙转氨酶是肝功能检查项目中一项比较灵敏的指标，实验用纸层折法观察肝脏谷丙转氨酶（ALT）的转氨基作用；用分光光度法测定血清谷丙转氨酶的活力。胆固醇广泛存在于动物体内，尤以脑及神经组织中最为丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。其溶解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙醚、氯仿等溶剂。胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重要物质，它不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁酸，维生素D以及甾体激素的原料。血清胆固醇是测定血脂的常规项目，试验用邻苯二甲醛法测定血清总胆固醇，来比较家鸡与乌鸡血清的区别。 实际材料、试剂和器材 （一）材料分析 乌鸡血清、家鸡血清、动物肝脏 （二）试剂 1、 血清胆固醇的定量测定（邻苯二甲醛法） （1）邻苯二甲醛试剂：称取邻苯二甲醛（A.R.）50mg，以无水乙醇（A.R.）溶解并稀释到50mL，冷藏，有效期1个半月。（2）90%醋酸（3）标准胆固醇应用液（0.1mg/mL）（4）混合酸：取 试剂2加等体积浓硫酸混匀即成。 （5）标准胆固醇贮液（1mg/mL）：准确称取胆固醇（A. R.）100mg以醋酸定容至100mL。 2、血清清蛋白与γ-球蛋白的分离与鉴定 （1）血清 （2）PBS（3）（NH4）2SO4溶液 （4）双缩脲试剂（5）酪蛋白（6）蔗糖（7）BaCl2溶液 3、凝胶层析 （1）Sephandex 4B 凝胶（2）生理盐水（3）5%重铬酸钾（4）5%蓝葡聚糖 4、谷丙转氨酶活性的鉴定及活力单位的测定 （1）0.9% NaCl溶液