药物化学第十六章.pptVIP

第十六章 药品质量控制中的现代 分析方法与技术 基本要求 毛细管气相色谱分析法 手性药物的液相色谱分析法 核磁共振光谱分析法 气相色谱-质谱联用技术 基本要求 3．毛细管柱的性能评价评价指标：分离效率、表面惰性、热稳定性。评价方法：在一定的色谱条件下，分离各种测试物质，获得的特征性数据和峰对称性，以此来评价柱效和表面活性。在测定了柱效和表面活性之后，用流失速率试验来评价热稳定性。 （三）应用示例----人尿中劳拉西泮的检测1.测定意义：劳拉西泮(简称LRZ)上用为催眠、镇静和抗癫痫药物 ,常被犯罪分子作为麻醉药物用于麻醉抢劫等麻醉后犯罪。为了确证这类案件的性质 ,经常需要对受害人的血、尿等体液中麻醉药物或其代谢物进行检测。人体摄入该药后其血液中药物浓度较低 ,且犯罪分子所用药量一般不使受害人死亡,而且此类案件一般报案较迟，因此血中药物浓度较低 ,对其检测较为困难。该药主要以葡萄糖醛酸苷的形式由尿液排泄。  2.色谱条件：HP-5毛细管柱(30ｍ×0.32mm ,膜厚0.1μｍ)。氮磷检测器,不分流进样(阀关闭时间0.75min),进样口温度:280℃,柱温:200℃(1min)20℃/min280℃ (15min),载气为高纯氮(2.2ｍml/min),尾吹气为高纯氮(10ml/min)。 4.方法学评价（1)选择性: 空白尿1ml及空白尿1ml加LRZ和HEF标准液,经酶解、萃取后进样分析所得色谱图表明尿中杂质不干扰检测.（2)线性试验: 用空白尿配制不同浓度的LRZ标准液进行酶解、萃取、进样分析,将LRZ与HEF色谱峰面积的比值与LRZ在尿液中的质量浓度进行线性回归,得到工作曲线方程 :Y=3.1×10-3X –3.0×10 -3 ,ｒ =0.998。LRZ在尿中的浓度为50～500μg/L范围内呈良好的线性. 2．手性流动相拆分法（手性洗脱法或手性流动相添加剂法）：将手性试剂加入流动相中，手性添加剂与样品形成手性络合物。常用的手性添加剂：配基交换型手性添加剂、环糊精类添加剂、手性离子对络合剂 示例一、左旋吡喹酮中吡喹胺的检查（柱前手性衍生化法）手性衍生化试剂：乙酰葡萄糖异硫氰酸酯色谱条件：色谱柱 NOVA-Pack C18（150mm×3.9mm） 流动相 甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钾 （pH2.8）（51∶49） 该法所用的手性衍生化试剂可以与一级胺、二级胺在温和的条件下迅速反应，所生成的非对映体衍生物可以在普通色谱系统中进行分离分析。 * * 返回主目录 一、熟悉毛细管气相色谱法、手性药物的高效液相色谱法的基本内容及其在药物分析中的应用。 二、熟悉核磁共振光谱分析法的定量方法及其在药物分析中的应用。 三了解毛细管电泳分析法、红外光谱法、联用技术在药物分析中的应用。 返 回  毛细管气相色谱法使用的色谱柱是空心的毛细管柱，叫开管柱：固定液涂渍或固定化在柱管内壁上，而载气和其中的样品从中心的通道上通过。柱材料主要是熔融石英（FSOT）。 一、高分辨气相色谱法 （一）色谱柱1．毛细管柱的类型： 柱类型 柱内径 柱长 液膜厚度普通开管柱 0.2～0.53mm 5～60m 0.1～1.0μm 壁涂开管柱 多孔层开管柱 担体涂渍开管柱 微内径开管柱 ﹤100μm大内径开管柱 0.32mm 1μm或5μm 2．毛细管柱的选择常用的固定液有：SE-31、OV-1、SE-54、SE-52、OV-1701、Carbowax 20M。柱的选择：根据样品组分的沸点，一般地，相差2℃或2℃以上的组分，采用非极性毛细管柱分离；若沸点相差在2℃以内的组分，则需在极性较大的毛细管柱上分离。 ? （二）进样方式 ?分流进样：使用方便，对分流比、进样温度 样品和载气的情况、进样体积和 浓度、进样重复性需要注意。  不适于痕量分析和宽沸程样。 适合大多数类型的样品，样品浓 浓高、各组分的浓度相近 不分流进样：须利用溶剂效应或冷阱，操作较难  特别适用于痕量分析和宽沸程样品柱头进样：必须使用外径为0. 17 ～ 0