细胞凋亡途径探讨二仙汤治疗大鼠卵巢早衰试验研究-世界科学技术.PDF

2015　第十七卷　第四期　★Vol.17 No.4 细胞凋亡途径探讨二仙汤治疗大鼠 卵巢早衰实验研究＊ 张丽娟，陶仕英＊＊，赵丕文，冒湘琳 　 　 （北京中医药大学基础医学院 北京 100029 ） 摘　 要：目的：通过卵泡颗粒细胞的凋亡途径探讨二仙汤对化疗性损伤卵巢早衰的影响。方法：将SD 大 鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和二仙汤组，腹腔注射顺铂建立化疗性损伤大鼠卵巢早衰动物模型。造模 后连续4 周各组灌胃给予相应药物治疗。观察大鼠一般情况；测定血清中E 、FSH、LH 和Pro 含量；观察卵 2 巢组织形态；TUNEL 法分析卵泡颗粒细胞的凋亡；免疫组化检测BAX、Bcl-2 和VEGF 蛋白的表达情况。结果： 模型组体质量下降，动情周期紊乱，治疗后体质量增加，动情周期恢复。与正常组比较，模型组E 、LH 下降， 2 FSH 水平升高，Pro 含量各组比较无显著差异。TUNEL 检测模型组较正常组阳性表达增多，二仙汤组较模型 组阳性表达减少。模型组较正常组BAX 表达明显升高，Bcl-2 下降，二仙汤治疗后与模型组比较BAX 表达 量下降，Bcl-2 表达升高；VEGF 蛋白在模型组中表达明显低于正常组，二仙汤组较模型组表达增多，阳性组 表达略有恢复。结论：顺铂可致卵泡颗粒细胞凋亡，造成卵巢功能过早衰退；二仙汤通过调节血清中各激素含 量，改变凋亡细胞相关蛋白的表达量来降低顺铂对卵巢的损害，促进卵泡发育，改善并增强卵巢功能。 关键词 ：卵巢早衰　二仙汤　卵泡颗粒细胞　凋亡 doi ：10.11842/wst.2015.04.011　　中图分类号：R285.5　　文献标识码：A　　 卵巢功能早衰（Premature Ovarian Failure，POF） 发育时期的卵泡有不同程度的损伤，并可导致血清 是指妇女青春期发育后若在 40 岁前发生闭经、卵巢 中相应激素水平发生变化[5] 。本实验根据这一原理 萎缩、体内雌激素水平低落、促性腺激素水平高达绝 建立化疗性损伤卵巢早衰动物模型，进而探讨二仙 经期水平的现象，是常见的妇科内分泌疾病。近年 汤治疗卵巢早衰的作用机理和对卵泡颗粒细胞凋 来研究证实，由于卵巢早衰患者卵巢分泌的雌激素 亡的影响。 量减少，可导致一些其它疾病，如骨质疏松、泌尿生 1　 实验材料 殖道萎缩、脂质代谢紊乱、心血管类等疾病[1,2] 。 . 　 实验动物 顺铂是一种可以用来治疗多种肿瘤的化疗药 1 1 物，但又有一定的副作用，与卵巢的损害有直接关 健康雌性 SD 大鼠 60 只，体质量 190-210 g，清 系[3] 。有研究表明顺铂可诱导卵巢细胞凋亡，引起 洁级，检疫合格，由北京维通利华实验技术有限公 组织坏死，从而导致卵巢功能早衰[4] 。顺铂对不同 司提供，动物许可证号：SYXK（京）2011-0039。动 物饲养在室温、自然光照的清洁级实验室内，食水 　　　收稿日期：2014-09-24 　　　修回日期：2014-10-29 ＊ 国家自然科学基金委面上项目（539/02405 ）：基于PI3K/AKT 信号通路探讨二仙汤治疗化疗损伤性卵巢早衰作用机理，负责人：牛建昭；教育 　　 部大学生创新性实验计划项目（201310026056 ）：二仙汤改善大鼠卵巢早衰机制的初步探究，负