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杂交瘤无血清培养基
使用说明文件(2017年版)
杂交瘤细胞无血清培养基使用说明书
【产品名称】
杂交瘤细胞无血清培养基
【规格与保存】
产品货号 产品名称 包装规格 保存条件 保存期限
NC0301 杂交瘤细胞无血清培养基 1000mL/瓶 2-8℃,避光保存。 12个月
NC0301.S 抗增剂 100mL/瓶 2-8℃,避光保存。 12个月
*抗增剂,并不用于杂交瘤细胞的培养。仅单独用于培养后期刺激抗体表达。
对于表达量较低的杂交瘤细胞系,可通过抗增剂后期刺激,进一步提高抗体表达量。
【用途与描述】
本培养基可用于杂交瘤细胞的培养,以获取特定的单克隆抗体。
杂交瘤细胞是将免疫小鼠的淋巴细胞(B细胞)与小鼠骨髓瘤细胞融合在一起,该细胞既具备细胞能够产生特异性抗体的特性,
,同时又具有骨髓瘤细胞的无限增殖能力,是目前单克隆抗体生产常用的细胞株,杂交瘤无血清培养及化学成分明确、没有添加血清
或血清替代物(血小板裂解物)、没有任何动物源的组分。产品批间差异小,所有原料均符合GMP标准。更适合临床研究用途。
【主要组成成份】
氨基酸,维生素、无机盐、人白蛋白,转铁蛋白、胰岛素、微量元素等。
【产品设计原理】
在诸如DMEM、MEM、M199等基础培养基之上,添加了各种氨基酸、维生素、无机盐、白蛋白、转铁蛋白、胰岛素、
微量元素,既能培养杂交瘤细胞,又能培养小鼠骨髓瘤细胞(sp2/0)。
【产品性能指标】
PH值:7.0-7.4
渗透压:270-350 mOsm/Kg
无菌:霉菌、细菌不得检出
内毒素:小于0.25EU/mL
装量:1000mL/瓶
外观:橘红色澄清液体
保存温度:2-8℃,避光保存
6-1
【使用前特别提示】
1. 本产品的使用方法与血清培养基及血清替代物培养基相比,确有差别。
敬请用户仔细查看本产品使用说明书后操作,请勿仅以既往经验使用本产品。
与血清培养基相比,本产品在培养某些杂交瘤细胞时,需提前进行驯化,如直接培养,生长效果不能达到最佳状态。
1) 对于采用血清及血清替代物培养的杂交瘤细胞,在初次使用Yocon 杂交瘤细胞
无血清培养基时,为防止培养环境的剧烈变化对细胞造成的损伤,需要对细胞
进行驯化操作。
首次更换为Yocon 杂交瘤细胞无血清培养基时,需要在其中添加原培养方法中
等量的血清或者替代物。在此后的两次细胞传代中,依次减半血清或者替代物
的浓度。第三次传代,直接离心取上清,更换为Yocon 杂交瘤细胞无血清培养
基,完成驯化过程。
2) 对于采用 无血清培养基培养 的杂交瘤细胞,可以直接更换为本产品进行换液和传代操作,
无需经历驯化过程
2. 使用培养基静态培养和动态培养的不同之处
静态培养:如客户静态培养,可直接使用本培养基,无需做任何处理
动态培养:如客户动态培养,需额外添加0.1%PLURONIC F-68,防止在搅拌培养中,剪切力对细胞的损伤。
如未添加防剪切力保护剂,细胞生长不佳,甚至死亡。
【完全培养基准备】
完全培养基2-8℃可避光保存12个月 。使用前室温平衡。
静态培养,可直接使用该培养基
动态培养,每1L 培养基添加10mL F-68溶液(10%),混匀备用。
【使用环境1:静态培养法】
培养器皿 :培养皿或T25细胞培养瓶
5 培养条件 :5%二氧化碳环境 培养要求 :直接使用,无需添加其它组分
接种密度 :1-2x10cells/mL
6 5
待传代密度 :1x10cells/mL 传代后最佳密度 :2-3x10cells/mL
不离心传代(以T25瓶为例):
5
1、复苏细胞时,接种5mL培
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