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不同外植体及激素组合对花魔芋组织培养效果影响
不同外植体及激素组合对花魔芋组织培养效果影响
摘要:以花魔芋的顶芽、侧芽、皮上芽孢、块茎作为外植体,研究不同类型外植体与激素组合对花魔芋组织培养效果的影响。结果表明,花魔芋组织培养效果对不同类型外植体表现出较强的选择性,顶芽最适宜作为花魔芋组织培养的外植体材料,其次分别为侧芽和皮上芽孢,而块茎不宜作为外植体使用。同时不同激素组合对花魔芋组织培养的效果亦有显著影响,6-BA和NAA的浓度均为1.0mg/L的培养基有利于魔芋愈伤组织的诱导培养。 关键词:魔芋;外植体;组织培养;NAA;6-BA 魔芋(Amorphophallusconjac)学名蒟蒻,为天南星科(Araceae)魔芋属(Amorphophallus)多年生草本植物,其底下球茎部分富含丰富的葡甘聚糖、果胶、生物碱、灰分及17种氨基酸和多种微量元素。中外研究及临床试验表明,魔芋中所含的葡甘聚糖对降低糖尿病人的血糖有较好的效果。富含葡甘聚糖的魔芋,营养丰富,是世界十大保健品之一,也是迄今为止发现的存在于植物界中的唯一可以合成大量葡甘聚糖的高等植物。魔芋除了作为重要的医疗保健品,同时也是重要的新材料和新资源,由于葡甘聚糖具有较好的粘着性、膨胀性、分散性等理化性质而被广泛应用于农业、工业,医药、纺织印染等行业。随着近年来加工技术不断提高,出口量不断地加大,市场的需求量也在不断地增加,使魔芋成为了广泛应用的重要经济作物。 随着市场需求量的扩大,传统的种植模式和方法已无法满足市场的需求,从而也就刺激了魔芋种植向规模化产业化方向转变。在魔芋种植面积不断扩大向规模化转型的过程中,用种量大、繁殖系数低、种苗退化、病虫害等问题成为制约魔芋产业发展的重要因素。通过植物组织培养技术,对魔芋进行组织培养获取组培苗是解决以上制约魔芋产业发展因素的一条有效途径。 植物组织培养是一项当前已被广泛应用于大量草本植物和部分木本植物快速繁殖体系建立的技术。据报道表明,当前在香水白掌、洪拉斯白掌等观赏植物上已经成功建立起了组培快繁技术。在对粉香槟红掌幼嫩叶片进行诱导,短时间可内获得大量愈伤组织,并最终能诱导形成一定数量的完整植株。关于魔芋的组织培养的研究,早在20世纪80年代后就已经有报道,但由于未探明培养速度慢、增殖以及分化速度缓慢的原因,并未运用于实践生产。近年来,许多关于魔芋组织培养技术的研究虽然在一定程度上取得了较为乐观的成果,但通过分析和对比其研究结果时,发现在对于外植体的选用问题上出现说法不一的现象,对于不同外植体的分化能力研究和对于不同外植体适宜的培养基其研究结果均存在差异,对于从接种到形成完整植株持续的时间较长,各方面技术环节都存在一定的限制因素。 然而,目前关于魔芋组织培养行之有效的快繁体系一直未能建立起来,建立一套完整、成熟的魔芋组织培养快繁体系仍是努力的目标。外植体类型对组织培养的诱导效果作为魔芋组织培养快繁体系的一部分,研究其对整个体系的建立具有巨大的推动作用。鉴于此,本研究拟开展不同外植体与激素种类及浓度对魔芋组织培养效果的影响,以期为花魔芋组织培养外植体的选择,及激素种类和浓度的使用提供科学依据,为魔芋产业的可持续发展提供技术支撑,研究成果具有良好的生产应用前景和实践指导意义。 1材料与方法 1.1材料 以种植于凯里学院校内农科教合作人才培养基地,健康且无病虫害的2年生花魔芋作为试验材料。 1.2方法 1.2.1不同外植体对花魔芋组织培养效果的影响。魔芋块茎从试验种植地取出后,先用水冲洗掉表面携带的大量泥土,然后用洗洁剂洗涤魔芋块茎,直至完全去除表面泥土。将洗净后的块茎用流水冲洗30~40min。用小刀取出顶芽、侧芽、皮上芽孢,块茎切成2~3cm2小块,取下的外植体分别装入不同烧杯,并用纱布封口绑紧放于水龙头下,流水冲洗20~30min。然后将不同外植体在超净工作台上用75%酒精浸泡并晃动30s,无菌水清洗2次,每次3min。再用0.1%升汞溶液浸泡10min并来回晃动。无菌水清洗4次,每次5min,放入装有无菌水的无菌培养瓶中浸泡备用。将不同外植体分别接种于MS+6-BA(1.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)培养基上,比较不同外植体愈伤组织诱导的影响。每处理的每次重复接种30瓶,每处理4次重复。 1.2.2不同激素组合对花魔芋组织培养效果的影响。以顶芽为外植体,按照1.2.1中所述的方法对外植体进行灭菌消毒处理,然后将外植体接种于6-BA和NAA不同浓度组合的培养基上进行培养,各具体处理如表1所示,各处理间相互为对照,每处理的每次重复接种30瓶,每处理3次重复。 1.3培养及数据记录方法 将1.2.1和1.2.2中不同处理接种后的外植体置于培养温度为21~25℃,培养光照强度为1500~2000Lx,光照时间每天12h的条件下进行培养。于培养
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