病原生物学实验设计论文.docVIP

病原生物学实验设计论文 论文题目：（） 研究内容摘要（200字以内） 关键词 （3-5个）：选题的目的和意义（主要说明：进行研究的必要性、预期达到的目的、实际应用价值和学术意义）（600字以内） 比如女性尿道炎如果不及时治疗会引起不孕。同时，尿路感染还会引起很多严重的并发症：如肾乳头坏死，肾周围炎和肾周围脓肿，感染性肾结石，革兰氏阴性杆菌败血症等，这些并发症往往比原症状引起更严重的后果， 一次不得不引起人们的重视。 我们从病原学的角度来进行研究，对其清洁中段尿进行细菌学检查、鉴定及药敏试验，预期检查出该患者疾病的致病菌的种类及其致病性和药敏反应。 临床上的尿路感染和尿道炎的诱发因素有很多，由于泌尿、生殖系统在解剖、生理方面的特点，使致病菌在正常情况下不易停留、繁殖，故不易引起感染。但是，一旦泌尿、生殖系统发生病理改变，感染的防御功能被破坏，致病菌乘虚而人，从而诱发感染。诱发感染的因素主要有四方面：梗阻因素，机体抗病能力减弱，医源性因素，女性尿道特点。同时，感染因素也很多，常见的有以下四种：上行感染，血行感染，淋巴道感染和直接感染。 此研究可以为临床对尿路感染和尿道炎的快速诊断提供依据，同时在在学术方面也为细菌学的研究提供例子，同时也有可能为细菌学的发展以及尿路感染及尿道炎的诊断和治疗方面提供新的方法。 二、国内研究现状：（1000字以内） 尿路感染是常见的医院感染，仅次于呼吸道感染，占医院感染的。应用抗药物抗菌药物是国内外公认的短期内防治的有效方法，主要分为全身性应用和局部性应用两种。全身应用抗菌药物可杀灭尿液中的细菌，延缓的发生。经验治疗的静脉用药物有头孢曲松、头孢他啶、 内酰胺酶抑制剂复方(如阿莫西林／克拉维酸、氨苄西林／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦等)、氨基糖苷类、氟喹诺酮类及碳青霉烯类等抗菌药物 。局部应用抗菌药物常采取涂抹抗菌药物的方法。习惯采用青霉素、氯霉素、利福平、二甲胺四环素和葡萄糖胺基等 ，能有效防止细菌及炎性产物的黏附，预防早期生物膜的形成。 增加营养补充水分 的发生与基础疾病有关，慢性呼吸系统疾病、糖尿病、严重胸脑外伤和心血管系统疾病患者在留置导尿管期间容易发生菌尿症，这些患者大多年老体弱、自身免疫功能低下，并常伴有其他疾病，病情较为严重和复杂，在侵人性医疗操作时，很容易诱发外源性或内源性感染 。 三、拟采取的技术路线及实验方案 （1000字以内） 留尿前先用肥皂水或清洗液清洗外阴部，再用0.1%清洁液（如新洁尔灭等）消毒尿道口，但不可用抗生素和肥皂等清洗尿道口，以免影响细菌生存力。在排尿过程中，弃去前段排出的尿液，留取中段尿10ml于戴盖灭菌容器内，立即送检，2h内接种培养基。 （二））(改良Kirby -Bauer 法， K-B 法) (二)操作方法 1.制备接种菌液 挑选琼脂平板上、形态相同的菌落移种于M-H 液体培养基中，置35℃水浴箱中孵育4 h， 校正浊度至0.5 号麦氏管浊度。 2. 接种平板 制备好的接种菌液必须在15mm 内使用。用灭菌的棉拭子蘸取菌液，在管壁上旋转挤压几次，去掉过多的菌液。用拭子涂布整个培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60度，最后沿平板周边绕两圈，保证涂布均匀。 3. 贴纸片 须待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。首先选择菌种的敏感药物纸片，用镊子取纸片一张，贴在琼脂平板表面。用镊子尖压一下，使其贴平，纸片一旦贴下就不再拿起。因纸片中的药物已扩散到琼脂中。每张纸片间距不少于24 mm ，纸片中心距平皿边缘不少于15 mm。直径为90 mm 的平板最好贴6 张。贴上纸片后，须在15 min 内放(35 ± 2)℃孵箱中培养。 4. 孵育 必须用35℃:孵箱，平板在孵箱内最好单独摆放，不超过两个叠在一起，否则中间的平板达不到孵箱温度而产生预扩散的作用，平板孵育规定时间(一般为18 - 24 h) 后，读取结果。 注：1、葡萄菌属药敏试验常规首选抗生素为苯唑西林、青霉素、阿奇霉素、克林霉素、甲氨苄啶、万古霉素。肠杆菌属细菌药敏试验常规首选抗生素氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻吩、克拉维酸。白假丝酵母菌药敏试验常规首选抗生素为两性霉素B、制霉菌素、5-氟胞嘧啶。 2、细菌L型的药敏试验方法与细菌型相同，但由于临床上所分离的L型大多数不稳定，若移种于普通培养基上很容易回复为原菌。所以在测定药敏时必须应用高渗L型培养基，否则不是L型不生长，就是L型已回复，测到的结果不能反映L型的药敏情况。 四、预期结果（600字以内）×（1~6）μm,无芽孢，多数有周身鞭毛。需氧或兼性厌氧，营养要求不高，在普通培养基上生长良好，血平板生长为灰白、湿润、光滑的菌落，在肠道选择性培养基（MAC、EMB、SS）上，因乳糖分解或不分解，生长为不同特征的菌落。生化反应活跃，发酵葡萄糖，氧