第四章环境化学物的一般毒性及其评价..docVIP

第四章 环境化学物的一般毒性及其评价 第一节 化学物毒性评价的实验基础 一、实验动物的选择 实验动物是指经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可用于科学研究的动物。 物种选择 种类选择的依据： 对化合物的毒性反应及代谢过程与人相似；自然寿命不太长；易于饲养和实验操作；经济并易于获得 已知生理指标的数量、繁殖性能、已知的药理与生理特性等。 以选择哺乳动物为主。可采用2－3种，啮齿类和非啮齿类。常用大鼠、小鼠、豚鼠、家兔和狗，尤以大鼠使用很多。家兔或豚鼠常用于研究化合物的皮肤毒性，包括对粘膜的刺激。猫、狗也用于急性毒性试验，但因价贵不易于大量使用。猪为杂食动物，对一些化合物的生物效应表现与人有相似之处，尤其是皮肤结构与人较近似，适合研究经皮对人的危害。灵长类在物种上与人类接近，但因体大、价贵，不便大量使用。此外还可选用某些昆虫（蜜蜂）或水生生物。 （二）品系选择 品系指计划交配的办法获得的起源于共同祖先的一群动物。同一品系的动物具有共同的遗传来源、相似的外貌特征、独特的生物学特性及稳定的遗传性能。 1、近交系动物 指采用连续20代以上兄妹交配或亲子交配而培育的纯品系动物。遗传上高度一致，基因纯合度可达98.6-99.8%。优点：个体差异小，消耗实验动物少；结果易于重复和定量比较；组织相容性一致。 近交系特点：a.实验结果比较准确，可以避免遗传组成不同或个体差异太大等所引起的误差。b.实验结果的平均性较一致。因此每组仅用较少数的动物，即能看出显著性来。c.实验结果的重复性较大，因此，一次实验结果即具有实际意义，可以减少重复实验，缩短实验时间。e.易于获得预期结果，近交系动物遗传背景明确，对每个品系的生物学特性、生理学特点、易感病原等都有完整的背景材料。f.近交衰退，生活力弱，对生产环境要求高、产仔少、营养要求高。是胚胎学、生理学、遗传学研究的理想材料，也用于药效试验、安全评价等的动物实验。进行组织或肿瘤移植实验时，制作某些有遗传因素的人类疾病的动物模型时，近交系是必不可少的材料。在习惯上，突变系动物主要是指发生后一种的变异的动物。遗传物质发生突变，主要有如下几种情况： ??? ●可见突变，动物发生了可由肉眼观察到的变异。如，基本没有被毛及胸腺发育不全的裸小鼠、裸大鼠等。??? ●生化突变，动物的某一生化功能发生改变，甚至丧失。如严重联合免疫缺陷小鼠。??? ●致死性或条件致死性突变，致死性突变有显性和隐性两种，如镰状红细胞贫血症就是隐性致死性突变。也有一些致死性突变，在某种条件下动物可以存活，缺乏这种条件动物则会致死。 ??? 突变系动物主要应用于： ??? ●遗传机制的研究，如作染色体的基因定位等;??? ●人类疾病的动物模型，是这类型动物的最主要的应用领域。有些突变使动物的免疫系统功能改变，有的使内分泌系统、心血管系统功能发生改变。从而为医学生物学研究，提供了在实验动物身上复制各种人类疾病并加以研究的可能。??? ●突变系动物还可以用于其他的领域，如，利用免疫缺陷动物作环境质量监测等。特点：a.个体间遗传均一 近交系间F1杂种与其它杂种一没，个体间遗传变异与近交系一样很小，其基因位点均为杂合型（近交系为纯合型），因此能取得一致的实验结果。b.表现双亲的显性性状 c.环境适应性强 F1杂种对环境变化的缓冲机能和自我调节能力都比近交系高。d.具有杂种优势 F1杂种具有杂种优势的特点，如体质健壮、生长快、易于饲养管理、发育均匀、手术后恢复快等优点。封闭群动物个体间差异的大小，取决于祖代的来源。若来源于近交系的繁殖群，但群内不按兄妹近亲交配，而用随机交配的方式保种并繁殖生产;另一类是来源于非近交系动物群体，前者个体间差异小，后者差异大。封闭群动物在遗传上具有一定的杂合性，因而这类动物繁殖力高，适应能力强，保种及繁殖生产的成本较低，应用范围广。与近交系相比，封闭群动物的个体在遗传上仍存在相当的差异，因此实验的可重复性，及反应的一致性就不如近交系动物。但是，封闭群动物在实验中，却有比近交系更接近自然种群反应的特点。所以在实际中，封闭群动物被广泛地应用于教学、预实验、一般的药物初筛、以及毒性、安全性评价试验之中。无菌动物在自然界并不存，必须用人为的方法养育而成。一般将临产前的健康动物用麻醉药品或拉断颈椎处死后，立即浸泡在37℃灭菌液中，送进无菌室（或无菌隔离器），按无菌手术进行剖腹，切除带胎子宫（子宫内首先应无菌），将其浸入消毒液里并立即输送到另一只隔离器中，切开子宫取胎，经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐（电刀切断）后，放入隔离器内人工喂乳或用其他品系的无菌雌鼠作保姆代养。象小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦，故采用保姆代养。而象豚鼠因在一定程度上能自力饮乳，故人工哺乳较容易