一种提高色谱指纹谱保留时间重现性的新方法.PDFVIP

( ) 第 31 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究简报 第 10 期 　　　　 　 　 　　　　 　　　　　 　　 　 　　 2003 年 10 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1232～1236 一种提高色谱指纹谱保留时间重现性的新方法 王龙星　肖红斌　梁鑫淼 ( 中国科学院大连化学物理研究所 ,大连 116012) 摘 　要 　通过色谱热力学分析发现 ,在相同的分析条件下 ,即使采用不同的液相色谱系统或不同的色谱柱 ,组 分的保留时间存在简单的线性关系 ,应用该线性关系可提高不同反相 C18 柱间保留时间重现性 ,经过实际样品 在不同操作条件下的验证 ,表明该方法是正确而可行的。 关键词 　指纹谱 ,保留时间重现性 ,高效液相色谱 1 　引　　言 色谱指纹谱是近年来中药质量控制的热点1 ,2 ,提高不同实验室间色谱数据的重现性无疑对指纹谱 质量控制具有重要的意义。反相 C18 柱是高效液相色谱中使用最广泛的色谱柱 ,提高不同反相 C18 柱间 保留时间的重现性对指纹谱的实际应用有较大的帮助。对使用反相 C18 柱的液相色谱分析而言 ,造成在 同一条件下的保留时间漂移的原因是液相色谱仪器系统引起的保留时间漂移和色谱柱的差异引起的保 留时间漂移。本文通过色谱热力学理论分析找到了一个新方法 ,能够有效地提高不同 C18 柱保留时间的 重现性 ,对两个不同的 C18 柱校正前后保留时间的差别从最大 12 min 减少到了一般在 0. 2 min 以内。 2 　理论部分 3 Δ Δ ( β 根据色谱热力学 ,组分的容量因子 k 与色谱两相分配过程中的焓变 H 与熵变 S 的关系为: 是相比) Δ Δ S H ln k = ln - - lnβ ( 1) R R T Δ Δ 　　由于使用的填料类型是相同的 ,我们认为 ,在相同的操作条件下不同 C18 柱的焓变 H 与熵变 S 是相同的。它们的差别主要是 :不同 C18 柱其填料的相比 β是有一定差别 ,不仅不同品牌填料间的 β不 同 ,而且随着色谱柱的使用 ,固定相有轻微的流失这也将带来相比的变化; 由装柱过程带来的填料间孔 隙的大小与几何性状的不同以及色谱柱本身长度的不同引起的不同 C18 柱间死时间的差别。 ( ) ( ) ( ) ( β β 基于上面的分析与式 1 可以推出式 2 和式 3 k 、k 是两根不同 C