锦纶网兜集卵法原理.ppt

实验一 畜禽蠕虫学粪便检查法（一） 目的要求： 1、掌握动物蠕虫常见的实验室粪便虫卵检 查技术； 2、在光学显微镜下区分虫卵和异物； 3、认识吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等蠕虫虫 卵形态结构。 实验内容： 粪便采集的方法和要领； 粪便沉淀检查法； 粪便漂浮法； 锦纶网兜淘洗法； 认识动物主要蠕虫卵形态结构。 方法步骤： 直接涂片法（Direct Smear method）： 在清洁的载波片上滴一些甘油和水的等量混合液，再用牙签或火柴棍挑取少量粪便加入其中，混匀，夹去较大的或过多的粪渣，最后使玻片上留有一层均匀的粪液，其浓度的要求是将此玻片放于报纸上，能通过粪便液膜模糊地辨认其下的字迹为合适。在粪膜上覆以盖玻片，置显微镜下检查。检查时应按顺序地查遍盖玻片下的所有部分。 集卵法： 将分散在粪便中的虫卵集中起来，再行检查，以提高检出率。所采用的方法一般有两种类型。 （1）彻底水洗法（自然沉淀法） 原理：利用虫卵密度比水大则沉于水底而采取沉淀物检查。 方法：取粪便5g，加清水100ml以上，搅均成粪液，通过260—250μm（40—60目）铜筛过滤，滤液收集于三角烧杯或烧杯中，静置沉淀20—40min ，倾去上层液，保留沉渣，再加水混匀，再沉淀，如此反复操作直到上层液体透明后，汲取沉渣检查。此法特别适用于检查吸虫卵。 （2）离心机沉淀法 取粪便3g置于烧杯中，加10—15倍水搅拌混匀，然后将粪液用（40—60目）网筛过滤，装入离心管中。在电动离心机中以1500—2000转/分，离心1—2分钟。取出后倾去上层液，再加水搅合，离心沉淀。如此离心沉淀2—3次，最后倾去上层液，用吸管吸取沉淀物滴于载片上，加盖片镜检。 （3）饱和盐水漂浮法 原理：利用虫卵密度轻于饱和食盐水，当粪便以饱和盐水稀释时，虫卵则漂浮于溶液表面，而采取浮起物检查。 方法：取粪便10g，加饱和食盐水100ml，混合，通过250μm（60目）铜筛，滤入烧杯中，静置半小时，则虫卵上浮；用一直径5—10mm的铁丝圈，与液面平行接触以沾取表面液膜，抖落于载玻片上检查。此法又称费勒鹏法（Fulleborn’s method）。此法适用于线虫卵的检查。 （4）锦纶网兜集卵法 原理：利用孔径大小不同的金属筛或锦纶网筛，过滤粪液。当用40—60目筛时，虫卵可通过筛孔，而粗大的粪渣则被铜筛或锦纶网筛所扣留，这时可取滤下液经沉淀或漂浮法处理后检查。目前常采用260目的锦纶网兜过滤粪液，过滤时大部分虫卵被留于筛上，然后取筛内物检查。但较细小的（如球虫卵囊）仍可通过，遇此种情况仍应取滤出液检查。 方法：取粪便5—10g，加水搅匀，先通过40或60目的锦纶网兜过滤，滤下液再通过260目的锦纶网兜过滤，并在锦纶网兜中继续加水冲洗，直到洗出液体清澈透明为止；而后挑取兜内粪渣膜片检查。 此法适用于宽度大于60μm 的虫卵，通过以上处理，粗大粪渣被网兜扣留，纤细粪渣（直径小于40μm ）和可溶性色素均被冲走而使虫卵集中。 作业： 叙述兽医临床上动物粪便内蠕虫虫卵的直接涂片法、集卵法（沉淀法、饱和盐水漂浮法、锦纶网兜集卵法）的操作步骤，并绘出吸虫卵、线虫卵、绦虫卵的形态结构。 * * 钩 虫 卵 鞭 虫 卵 孢子化卵囊 等 孢 属 卵 囊