ABCE1蛋白在肺癌、癌旁组织及转移淋巴结中的Western blot及免疫组化法检测.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………”1 英文论著摘要……………………………………………………………………·4 二、英文缩略语………………………………………………………………………·7 三、论文 前言…………………………………………………………………………………………………………·8日U舌…………………………………………………………………………………………………………·8 材料与方法………………………………………………………………………”9 实验结果…………………………………………………………………………12 讨论………………………………………………………………………………………………………··l6 结论………………………………………………………………………………………………………··l8 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………19 五、参考文献…………………………………………………………………………·20 六、附录 综j苤………………………………………………………………………………………………………··22 致{射………………………………………………………………………………………………………”30 1 个人简介…………………………………………………………………………3 ·中文论著摘要· ABCEl蛋白在肺癌、癌旁组织及转移淋巴结中的 WesternbI ot及免疫组化法检测及意义探讨 目 的 carcinoma，或称肺癌)，是指起源 原发性支气管肺癌(primarybronchoginic 于支气管粘膜上皮或腺体的恶性肿瘤。其发病率和死亡率一直居高不下，自上世 纪80年代起，已成为全球范围内发病率最高的恶性肿瘤。肺癌早期诊断困难，65％ 的患者在确诊时已属晚期，转移成为其致死和治疗失败的主要原因。淋巴结转移 是肺癌扩散的主要途径，也是影响手术根治性及预后的主要因素。如果能找出淋 巴转移的相关基因，对认清肿瘤的进展和转移以及治疗有很大的帮助。ABCEl基 cassette E1)属ATP结合盒转运子基因亚家族成员之一， transporter 因(ATP-binding 其编码的ABCEl蛋白的结构中含有一个N端的Fe．s区和两个核酸结合区，文献报 道ABCEl是一种高度保守的蛋白，在所有的真核及原核生物中都有一到两种转录 本普遍表达。ABCEl蛋白最初被发现能够特异性结合并抑制哺乳动物细胞内一种 被干扰素诱导的核糖核酸酶L，因此又名为核糖核酸酶L抑制因子，之后的研究表 明它在HIV、SIV病毒限制性多肽的聚集方面也发挥着必须的作用。在酵母中的研 究显示，ABCEl表达的蛋白参与了细胞分裂及蛋白质翻译起始复合物的形成，同 的起始过程中发挥着必不可少的作用。众所周知，肿瘤细胞的蛋白翻译过程异常 亢进，许多参与翻译过程的蛋白因子如核糖体蛋白S6激酶，mTOR和4E．BPl等都 已成为肿瘤干预治疗的分子靶点。体外实验表明，抑制ABCEl表达能有效抑制人 类肿瘤细胞的生长。因此，我们推测在肿瘤细胞中通过抑制ABCEl的表达可有效 遏制肿瘤的进展。本实验就是通过免疫印迹(western blot)技术及免疫组化链 癌原发灶、转移淋巴结与癌旁肺组织之间的表达差异，从而评价其对肺癌进展和 转移的影响，评价其可能的临床意义。 实验方法 本实验采集临床手术切除的不同肺叶或肺段的人肺癌组织标本，及其转移淋 巴结和距离肿瘤边缘／5厘米的癌旁肺组织配对标本，用免疫组化链霉素抗生物素 蛋白．过氧化物(streptavidin 迹法(WesternBlot)法检测ABCEl蛋白的表达量差异。 结 果 达