聚乙二醇600中环氧乙烷与二氧六环.doc

环氧乙烷与二氧六环 标准规定：含环氧乙烷不得过0.0001%，二氧六环不得过0.001%。 检验方法：照气相色谱法《中华人民共和国药典》2010年版二部（附录V E）测定。 GC分析条件： 色谱柱：100%聚二甲基硅氧烷为固定相（30m×0.530 mm×3μm）的毛细管柱 检测器：氢火焰（FID） 载气：氮气 检测器温度：250℃ 进样口温度：150℃ 柱流量：2.5ml/min 吹扫流量：3.0ml/min 分流比：1：1 柱温程序：初始35℃保持5分钟，以5℃/分钟升温至180℃，然后以30℃/分钟升温至230℃，保持5分钟 顶空进样条件： 平衡温度：70℃ 定量环温度：80℃ 传递管线温度:90℃ 平衡时间：45min 定量环体积：1ml  系统性实验： a.对照溶液b色谱图中，乙醛和环氧乙烷的分离度应达到至少2.0，二氧六环峰高至少应为基线噪音的5倍。 b.分别将供试品溶液及对照溶液c顶空进样，重复进样至少3次。计算对照溶液c图谱中环氧乙烷和二氧六环峰面积的相对标准偏差和供试品溶液图谱中环氧乙烷和二氧六环含量的相对标准偏差。环氧乙烷三次测量值的相对标准偏差应不得过15%，二氧六环的3次测量值的相对标准偏差应不得过10% 溶液的配制： a.供试品溶液：精密称取供试品1g 置顶空瓶中，加入1.0ml超纯水，密封，摇匀，平行制备3份。 b.环氧乙烷储备液：环氧乙烷的取样操作均应在通风橱中进行，操作者应戴聚乙稀手套及合适的防护器具保护手和面部，所有溶液均应密闭，在2℃～℃保存。 环氧乙烷对照品置于冰水浴中降温，用冷冻的注射器，取约300μl液态环氧乙烷（相当于0.25g环氧乙烷），置50ml经处理过的冷的聚乙二醇400（取聚乙二醇400约500ml置1000ml圆底烧瓶中，以60℃，1.5～℃环境中温度平衡备用或储存）中，加入前后称重以确认加入量约为0.25克，用相同的溶剂稀释至100ml，用前充分摇匀，2-8℃保存。 环氧乙烷储备液的含量测定：取10毫升50%氯化镁的无水乙醇混悬液与20ml乙醇制盐酸滴定液（0.1mol/L）混匀，放置过夜使平衡。精密称量5g环氧乙烷储备液置上述溶液中混匀，放置30分钟，用0.1mol/L乙醇制氢氧化钾滴定液滴定，用电位法指示终点，用空白实验校正实验结果，以每1毫升0.1mol/L的乙醇制氢氧化钾滴定液相当于4.404mg的的环氧乙烷计算环氧乙烷储备液中环氧乙烷的浓度。空白平行测定两次，样品平均测定3次,以三次样品实验的结果为最终结果。 按以下公式计算环氧乙烷储备液中环氧乙烷的浓度： 公式中： M样-环氧乙烷储备液的取样量，g； CKOH-乙醇制氢氧化钾滴定液的浓度，mol/L； V样-环氧乙烷储备液消耗氢氧化钾滴定液的体积，mL； V空-空白实验消耗氢氧化钾滴定液的体积，mL c.环氧乙烷对照溶液的制备：临用前配制，精密称取1g冷的环氧乙烷储备液，置含40.0g冷的聚乙二醇400的50ml量瓶中，用冷的聚乙二醇400稀释至刻度，得环氧乙烷浓度为50μg/g的溶液（需要称量空瓶重、环氧乙烷储备液的取样量和最终定容后的总重量）。精密称取10g，置含30ml冷的超纯水的50ml量瓶中，用用相同的溶剂稀释至刻度。精密量取10ml，用水稀释至50ml（环氧乙烷浓度2μg/ml）。 d.二氧六环对照溶液的制备：精密称取二氧六环1.0g用水稀释至100ml，精密量取5ml，用水稀释至500ml（0.1mg/ml）。 e. 0.001%乙醛溶液：通风橱中操作，佩戴防护用具，精密量取40%乙醛1 ml置含50ml冷的超纯水的100ml容量瓶中，用冷的水稀释至刻度，摇匀；精密量取1.0ml置于 100ml容量瓶中，用水稀释至刻度并摇匀；再精密量取25ml置于100ml容量瓶中用水稀释至刻度并摇匀即得。 f.对照溶液a的制备：精密称取供试品1.0g 置20 ml顶空瓶中，加入0.5ml环氧乙烷对照溶液及0.5ml二氧六环对照溶液，密封摇匀即得。平行制备1份 。 g.对照溶液b的制备：精密量取0.5ml环氧乙烷对照溶液置20 ml顶空瓶中，加入新配制的0.001%乙醛溶液0.1ml及二氧六环对照溶液0.1ml，密封摇匀即得 。 e.对照溶液c的制备：精密量取环氧乙烷对照品溶液和二氧六环对照品溶液各5.0ml,置于10ml容量瓶中混匀，再精密量取1.0ml置于20 ml顶空瓶中，密封摇匀即得。自“再精密量取1.0ml”起平行制备3份。 样品的测定： 取对照溶液b顶空注入气相色谱仪，记录色谱图，调节检测灵敏度，使环氧乙烷和乙醛的峰约为满量程的15%。依次取对照溶液c（3份）、对照溶液a（1份）、供试品溶液（3份）顶空注入气相色谱仪，记录色谱图。 按以下公式分别计算环氧乙烷和二氧六环的含量： 环氧乙烷的含量：