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微生物生长是细胞物质有规律地
生长和控制:
1. 微生物生长与繁殖的定义。
微生物生长是细胞物质有规律地、不可逆的增加,导致细胞体积扩大的生物学过程。
繁殖是微生物细胞生长到一定阶段,由于细胞结构的复制与重建并通过特定方式产
生新的生命个体,引起生命个体数量增加的生物学过程。
2. 快速生长的细菌里DNA 复制与细胞分裂是如何协调的?
细菌中 DNA 的复制和细胞分裂两个过程的控制是不连接的。染色体以双向的方式
进行连续的复制,在细胞分裂之前不仅完成了染色体的复制,而且也开始了两个子
细胞的复制。其复制起点附着在细胞膜上,随着膜的生长和细胞的分裂,两个未来
的子细胞基因组不断的分离开来,最后到达两个子细胞中。
3. 微生物生长的测定方法有哪几种,各有什么优缺点?请举例说明。
以数量变化对微生物生长情况进行测定:通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生
物的生长情况或样品中所含微生物个体的数量(细菌、胞(孢)子、酵母菌)
1、培养平板计数法
对样品进行适当稀释 → 单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖
→ 肉眼可见的菌落 →对菌落数目的计数推测样品中的微生物细胞数
由于无法保证细菌细胞在分离过程中彻底分开,因此,一个菌落可能是多个细胞一
起形成,所以在科研中一般用菌落形成单位(colony forming units,CFU )来表示,
而不是直接表示为细胞数(个)。
1、稀释倒平板法
操作较麻烦,对好氧菌、热敏感菌效果不好!
2、涂布平板法
使用较多的常规方法,但有时涂布不均匀!
采用培养平板计数法要求操作熟练、准确,否则难以得到正确的结果:
2、膜过滤培养法
菌数低的样品(如水)→ 膜过滤 → 培养 → 菌落计数
3、显微镜直接计数法
采用细菌计数板或血球计数板,在显微镜下对微生物数量进行直接计数(计算一定
容积里样品中微生物的数量)。
不能区分死菌与活菌;
不适于对运动细菌的计数;
需要相对高的细菌浓度;
个体小的细菌在显微镜下难以观察;
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
以生物量为指标测定微生物的生长
1、比浊法
在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度(optical density, 即O.D.)表示菌量。
实验测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确
2、重量法
以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量;
通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算微生物群体的生物量;
测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法
3、 生理指标法
呼吸强度,耗氧量、酶活性、生物热 与其群体的规模成正相关
样品中微生物数量多或生长旺盛,这些指标愈明显,因此可以借助特定的仪器如瓦
勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。
常用于对微生物的快速鉴定与检测
4. 什么是细菌的生长曲线?生长曲线有什么特点?
生长曲线:细菌接种到定量的液体培养基封闭系统中,定时取样测定细胞数量,以
培养时间为横座标,以菌数为纵座标作图,得到的一条反映细菌在整个培养期间菌
数变化规律的曲线。
一条典型的生长曲线至少可以分为迟缓期,对数期,稳定期和衰亡期等四个生长时
期
5. 细菌群体生长有哪些不同时期,各有什么特点?其产生原因是什么?
1、迟缓期:细菌数不增加
原因:(1)种子老化 (2 )适应新环境的酶系统没有表达
2 、对数生长期:最大生长速率,对数增加,平衡生长
3、稳定生长期:生长速率为零,活菌数最多
原因:营养物质耗尽、代谢产物积累、pH 等环境变化引起细菌不宜生长
4 、 衰亡期:代谢活性降低、衰老自溶
原因:营养物质耗尽,有毒代谢产物大量积累
6.
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