牙鲆emx1基因的克隆及表达-生物技术通报.pdfVIP

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2017-09-03 发布于天津
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牙鲆emx1基因的克隆及表达-生物技术通报.pdf

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牙鲆emx1基因的克隆及表达-生物技术通报

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2016, 32 6 :161-167 牙鲆 emx1 基因的克隆及表达孙文慧张俊玲施志仪孙近近向玉婷陈晓武（上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水水产种质资源重点实验室，上海 201306）摘要：为阐述空通气孔同源框1（，）基因在牙鲆发育中的作用，通过PCR技术克隆牙鲆 empty spiracles homeobox 1 emx1 emx1 基因，运用BioEdit、MEGA等软件分析其序列结构特征，并采用荧光定量PCR技术分析其在牙鲆早期发育和组织分布中的表达情况。结果成功获得一长度为1 127 bp的牙鲆emx1 cDNA序列，其中包括708 bp的开放阅读框，编码235个氨基酸。同源性比对发现，牙鲆emx1 基因的氨基酸序列与雀鲷和花鳉同源性最高，为95%，与其它物种如斑马鱼、墨西哥脂鲤、原鸡、热带爪蟾、小鼠和人的同源性分别为87%、84%、83%、80%、72%和72%。系统进化树分析显示，牙鲆Emx1蛋白与鱼类Emx1 紧密聚为一支。荧光定量 PCR显示，基因在牙鲆卵巢中的表达量丰富，精巢中次之，而在其他各组织的表达量则较低。在从原肠胚到 emx1 emx1 孵化后10 d的牙鲆早期发育中也发现了相对较高的表达，且在胚孔封闭和心跳期有最高的表达。结果表明emx1 基因很可能在牙鲆早期发育和生殖系统中发挥重要作用。关键词：空通气孔同源框1（emx1 ）；牙鲆；cDNA克隆；基因表达 DOI：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2016.06.023 Identification and Expression Analysis of emx1 from Paralichthys olivaceus SUN Wen-hui ZHANG Jun-ling SHI Zhi-yi SUN Jin-jin XIANG Yu-ting CHEN Xiao-wu （Key Laboratory of Genetic Resources Freshwater Aguaculture and Fisheries ，College of Fisheries and Life Science ，Shanghai Ocean University ， Shanghai 201306 ） : To explore the function of the （）gene in the development of ，the Abstract empty spiracles homeobox 1 emx1 Paralichthys olivaceus emx1 was cloned by P