碳源氮源对异养单针藻monoraphidiumspfxy-10油脂积累和脂肪酸.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１３，３３（２）：５９６４ 碳源、氮源对异养单针藻Ｍｏｎｏｒａｐｈｉｄｉｕｍｓｐ．ＦＸＹ１０ 油脂积累和脂肪酸组成的影响 黄　力　贺赐安　赵　鹏　余旭亚 （昆明理工大学生命科学与技术学院　昆明　６５０５００） 摘要　研究了碳源与氮源对单针藻Ｍｏｎｏｒａｐｈｉｄｉｕｍｓｐ．ＦＸＹ１０异养培养的影响。以ＢＧ１１为基 础培养基，通过添加不同类型、浓度梯度碳源和氮源，比较分析微藻生物量、油脂积累以及脂肪酸 组成。结果表明，以葡萄糖作碳源，硝酸钠为氮源，微藻细胞积累的油脂是理想的生物柴油制备 原料。硝酸钠浓度分别为１．００、３．００和５．００ｇ／Ｌ时，对油脂产量影响不显著（Ｐ＞０．０５）。葡萄糖 浓度为１０．００ｇ／Ｌ，硝酸钠为氮源油脂产量达到实验最高值０．８４ｇ／Ｌ，其油脂脂肪酸组成主要由Ｃ１６ ∶０和Ｃ１８∶１等短链饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸组成，不饱和度值（ＤＵ）为６１．９８，相对偏低。 关键词　碳源　氮源　单针藻　异养　油脂产量 中图分类号　Ｑ８１９ ［１１］ 　　产油微藻因可积累较高油脂含量已成为良好的生物 究结果表明 ，微藻异养细胞的油脂产率比自养培养 质资源应用于生物柴油开发，同时微藻具有生物量积累 的细胞油脂产率高２１．６０倍。为选择适宜的碳源与氮 较快，无周期限制，培养条件易控制并可再生等特点已备 源进行微藻的异养培养，有效积累油脂，本实验以该藻 ［１］ 受研究者关注 。而微藻油脂的高效积累是其能源开发 为对象，比较研究了７种有机碳源和５种氮源对微藻生 应用的基础，有文献报道实验选用普通小球藻在高密度 长、油脂合成及脂肪酸组成的影响，以期为后期放大培 ［２］ 发酵培养下油脂产量平均每天高达３．７ｇ／Ｌ 。 养奠定基础。 　　微藻异养培养是一种采用有机碳源作为能源而不 ［３］ １　材料与方法 需要光照的一种培养方式 。与其他培养方式相比， ［４５］ 异养培养微藻具有生长周期短、比生长速率大 、短 １．１　主要材料、试剂与仪器 ［６］ 时间内获得较高的细胞终密度、较高的油脂产率 且 　　单针藻Ｍｏｎｏｒａｐｈｉｄｉｕｍｓｐ．ＦＸＹ１０，昆明理工大学 下游成本低［７］等诸多优点。此外有研究表明，异养培 生物炼制研究组分离、保藏；冷冻干燥机（Ｊｏｕａｎ，法 养不仅可以提高油脂产率，同时可以增加微藻细胞内 ［４５，８］ 国），恒温振荡摇床 （天呈，上海），冷冻离心机 油脂含量 ，且培养基中氮源的选择以及浓度的变 ［９１０］ （Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ，德国），尼康显微镜系统（Ｎｉｋｏｎ，日本），安 化可以显著影响微藻油脂含量 ，但并不是所有的微 捷伦７８９０ＧＣ５９７５ＭＳＤ气质联用仪（Ａｇｉｌｅｎｔ，美国）；实 藻都可以进行异养生长。故对于不同的藻种，选用合 验用试剂均为分析纯，均购自昆明鼎国试剂公司。 适的培养方式以及恰当的培养基组成以期获得较高的 １．２　微藻培养 油脂产率非常重要。 　　单针藻Ｍｏｎｏｒａｐｈｉｄｉｕｍｓｐ