试验二食品中总氮的测定.docVIP

实验二 食品中总氮的测定 （二）原理 有机物中的氮在强热和浓H2SO4作用下，生成（NH4）2SO4，在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出氨，用硼酸将氨吸收后以盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，计算蛋白质含量。 （三）仪器与试剂 1. 定氮蒸馏装置（如图3-1），微量滴定管。 2．硫酸铜，硫酸钾，硫酸。 3．2%硼酸溶液 称取20g硼酸溶解在少量蒸馏水中，再稀释至1000ml。 4. 混合指示剂 1份0.1％甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。 5．40%氢氧化钠溶液 40g氢氧化钠溶解于蒸馏水中，再稀释至100ml。 6．0.05mol／L盐酸标准溶液 （四）操作步骤 1．样品处理 精密称取0.2～2.0g固体样品或2～5g半固体样品或吸取10～20ml液体样品（约相当氮30～40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加人0.2g硫酸铜、3g硫酸钾及20ml硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5h。取下放冷，小心加20ml水。放冷，移人100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容置瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。 ?2．按图⒊1装好定氮装量，于水蒸气发生瓶内装水至约2／3处，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 3．向接收瓶内加入10m1 2％硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插人液面下，吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室，以10ml水洗涤小玻杯并使其流入反应室内，塞紧小玻杯的棒状玻塞。将10m1 40％氢氧化钠溶液倒人小玻杯，提起玻塞使其缓缓流人反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏5min。移动接收瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.05mol/L盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。 同时吸取10.0ml试剂空白消化液按3操作。 4．结果计算 蛋白质中的氮含量一般为15％～17.6％，按16％计算乘以6.25即为蛋白质含量，乳制品的蛋白质换算系数为6.38，面粉为5.70，玉米、高粱为6.24，花生为5.46，米为5.95，大豆及其制品为5.71，肉与肉制品为6.25，大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83，芝麻、向日葵为5.30。 （五）注意事项 1. 消化要在通风橱内进行，消化时要把附在管壁上的食物用少量硫酸冲下，使消化完全。蒸馏时要随时注意防止蒸馏器漏水漏气等现象的发生。 2. 蒸馏时向反应室内加NaOH动作要快，玻璃塞塞严并立即用少量水密封，以免氨的逸出。 3．严禁酸碱污染硼酸吸收液及冲洗用水。 4．测定前应先用标准（NH4）2SO4做氮回收率的测定，借以验证所用仪器，试剂及操作等条件的可靠性。氮回收率应在95％与105％之间。 总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法GB 11894－89Water quality-Determinatlon of total nitrogen-Alkaline potassium persulfate digestion-UV spectrophotometric mcthod1 主题内容与适用范围1.1 主题内容本标准规定了用碱性过硫酸钾在120～124消解、紫外分光光度测定水中总氮的方法。1.2 适用范围本标准适用于地面水、地下水的测定。本法可测定水中亚硝酸盐氮、硝酸盐氨、无机铵盐、溶解态氨及大部分有机含氮化合物中氮的总和。氮的最低检出浓度为0.050mg／L，测定上限为4mg／L。本方法的摩尔吸光系数为1.47×103L?mo1－1?cm－1。测定中干扰物主要是碘离子与溴离子，碘离子相对于总氮含量的2.2倍以上，溴离子相对于总氮含量的3.4倍以上有干扰。某些有机物在本法规定的测定条件下不能完全转化为硝酸盐时对测定有影响。2 定义2.1 可滤性总氮：指水中可溶性及含可滤性固体(小于0.45μm颗粒物)的含氮量。2.2 总氮：指可溶性及悬浮颗粒中的含氮量。3 原理在60以上水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧，硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子，故在氢氧化钠的碱性介质中可促使分解过程趋于完全。分解出的原子态氧在120～124条件下，可使水样中含氯化合物的氮元素