气相色谱鄄质谱法测定大菱鲆肌肉中羧甲基赖氨酸含量-分析化学.pdfVIP

第43卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 研究报告 第8期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2015年8月 ChineseJournal of Analytical Chemistry 1187~1192 DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.150203 气相色谱鄄质谱法测定大菱鲆肌肉中羧甲基赖氨酸含量 1 1摇 2 1 *1 王 菁摇 田盛兰 孙伟红摇 林 洪摇 李振兴 1 2 (中国海洋大学食品科学与工程学院,青岛266003)摇 摇 (中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071) 摘摇 要摇 建立了大菱鲆肌肉中羧甲基赖氨酸(CML)的气相色谱鄄质谱(GC鄄MS)检测方法。 以大菱鲆为研究对 象,选用三氯甲烷/ 丙酮对样品进行脱脂,经硼氢化钠还原、蛋白水解、净化、衍生化(酯化与酰化)后,进行 GC鄄MS选择离子监测(SIM)模式检测。 选取m/z 392为定量离子,m/z 392,365,333,305为定性离子。 结果 表明,CML三氟乙酰甲酯化衍生物峰面积与浓度在 1~200 滋g/ L 范围内呈良好线性关系,方法检出限为 1mg/ kg,定量限为5 mg/ kg,3个加标水平(10,150 和350 mg/ kg) 下的平均回收率在100% ~104%之间,相 对标准偏差RSD5%(n=5)。 关键词摇 羧甲基赖氨酸;大菱鲆;气相色谱鄄质谱;衍生化 1摇 引摇 言 晚期糖基化终末产物(Advanced glycation endproducts,AGEs)是食品中蛋白、脂质和核酸等组分在 [1] 着 热加工过程中发生非酶糖基化反应的产物 ,其中羧甲基赖氨酸(N 鄄carboxymethyl鄄lysine,CML)为主 [2] 要标志性产物 。 研究表明,食品中AGEs与心脑血管疾病、肾脏疾病、糖尿病及其并发症等慢性疾病 [3,4] 有密切关系 。 为更好地监测其在食品中含量,建立灵敏可靠的检测方法非常必要。 [1,5] [6~8] 目前,关于食品中CML检测方法有酶联免疫法(ELISA) 、高效液相色谱法(HPLC) 、液相色 谱鄄质谱联用法(LC鄄MS)[9,10] 等。 ELISA 法操作相对简便,但假阳性率高,仅能得到 CML 相对值 (kU/ g);HPLC法通过衍生化使CML具有荧光性并定量分析,但该具有荧光特性的衍生物不稳定,导致 结果偏差较大;LC鄄MS具有良好的灵敏度,又避免了衍生化处理,但基质干扰带来的离子抑制效应难以 [11] 避免,且检测成本昂贵 。 GC鄄MS具有高灵敏度、高选择性的优势,有望开发成有效的CML检测方法。 [12] Am佴lie 等运用GC鄄MS对食品中CML进行检测,由于前处理、基质差异等原因,虽成功检测到奶粉等 产品中的CML,但未检测到鲑鱼中的CML。 目前,尚未见水产品中CML确证检测方法的报道。 本研究 以海水鱼中重要养殖品种大菱鲆为研究对象,利用 GC鄄MS 测定鱼肉中 CML 含量,定量限由 [12] 150 滋g/ L 降到5 滋g/ L,为水产品中CML检测提供了技术参考。 2摇 实验