固定化纤维素酶的制备及其性质的分析研究.pdfVIP

固定化纤维素酶的制备及其性质研究 摘 要 固定化酶作为现代生物工程技术的重要组成部分之一，在工业、医学、分析 与分离技术以及化学合成等领域有着广泛的用途。本文从固定化酶的载体、固定 化纤维素酶的制各方法和性质以及固定化纤维素酶反应动力学模型等方面进行了 研究。 选择淀粉接枝丙烯腈、丙烯酰胺聚合物为载体，用物理吸附法固定化纤维素 酶，同时以对．13一硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)为载体活化剂，采用重氮化法共价结 合固定化纤维素酶。实验以酶活力、比活力、蛋白载量和活力回收为指标，探讨 了给酶量、反应pH值、反应时间、离子强度等因素对固定化纤维素酶的影响。通 过游离酶、吸附法固定化酶和共价结合法固定化酶性质的比较，系统研究了固定 化酶的酶学性质，包括最适pH值、最适温度、米氏常数、热稳定性、重复使用稳 定性和储存稳定性等方面，固定化纤维素酶性质的实验结果表明：固定化酶的最 价结合法固定化酶的Km为O．1359／L。固定化酶的热稳定性、重复使用稳定性和储 存稳定性都有很大的提高。 建立了固定化纤维素酶反应动力学模型，在此基础上系统研究了席勒模数、 产物竞争性抑制、体系宏观底物浓度等因素对球形载体内部底物分布的影响，并 讨论了各因素对固定化纤维素酶效率因子的影响。 本文的研究工作为以后进一步开发适用于工业生产、性能优良的固定化酶以 及研究固定化酶酶促反应过程提供了必要的实验和理论基础。 关键词：淀粉接枝聚合物固定化纤维素酶吸附共价偶联效率因子 onthe and of InvestigafionPreparationProperties ImmobilizedCellulase ABSTRACT oneofthe and As ofmodem importantcomponentsbioengineeringbiotechnology, Immobilized hasbeen usedinthefieldsof enzymetechniquewidely industry,medicine， coversthe analyticalseparationtechniques，chemicalsynthesis，etc．Thisp印er researchworkinthe carrierofImmobilizedmethods followingaspects：the enzyme，the ofimmobilized in ofimmobilizedcellulaseanda cellulase，the changesproperties kineticsmodelofimmobilizedcellulase． Cellulasewasimmobilizedonthe carrier was theSD2TIe alsoimmobilized byadsorption．Attime，cellulase copolymers onto4-amiono-benzenestarch carriermeansof sulfonylethylgraftcopolymersby diazotization．111ecarriedtheresear