Resveratrol抑制CD4+T细胞活化和机制研究.pdfVIP

+ 中文摘要 Resveratrol 抑制CD4 T 细胞活化及机制研究 中文摘要 Resveratrol （白藜芦醇）又称芪三酚，化学名称为3，5，4′-三羟基二苯乙烯， 是蒽醌萜类化合物。其广泛存在于葡萄科、百合科、豆科等多种植物中。白藜芦 醇具有广泛的抗肿瘤、抗心血管疾病、抗炎、抗氧化、抗衰老、神经系统保护等 作用,它已成为科学家们高度重视的天然活性成分。本研究中首先我们探讨了白藜 + 芦醇对于 CD4 T 淋巴细胞活化的作用影响。体外实验中通过流式细胞术检测及 + Brdu 细胞增殖检测均显示白藜芦醇能抑制小鼠脾脏CD4 T 细胞的增殖，且通过用 ELISA 对细胞因子(IL-2 、IL-4 、IL-5、IFN-)等的分泌检测显示白藜芦醇同样对细 胞因子的分泌也具有明显的抑制作用，进一步研究表明白藜芦醇对 T 细胞的凋亡 无明显影响。同时体内实验中我们检测CIA 小鼠血清中IgM 及细胞因子(IL-2 、IL-4 、 + IL-5、IFN-)等的分泌，并用Brdu 细胞增殖检测白藜芦醇小鼠脾脏CD4 T 细胞的 增殖影响。结果我们发现白藜芦醇能够明显抑制小鼠 IgM 抗体的产生，对细胞因 子无论是IL-2 、IFN-还是IL-4 、IL-5 的分泌均具有明显的抑制作用，且白藜芦醇 + 能在体内抑制CD4 T 细胞的增殖。随后为进一步研究其作用机制，通过western blot 发现白藜芦醇可提高小鼠脾脏T 细胞中sirt1 蛋白的表达量，同时发现当sirt1 被下 调后，白藜芦醇对小鼠脾脏 T 淋巴细胞无明显的抑制作用。说明白藜芦醇通过影 响Sirt1 表达调控T 细胞活化。为了进一步验证白藜芦醇是否影响了sirt1 的脱乙酰 化活性，我们通过免疫共沉淀方法检测了下游可能参与其信号转导的核转录因子 C-Jun、NFB 及NFAT 等的乙酰化水平，其结果显示白藜芦醇抑制了核转录因子 C-Jun 的乙酰化水平，但对于NFB 及NFAT 等的乙酰化水平并无明显影响，进一 步通过免疫荧光染色和共聚焦显微镜的观察发现白藜芦醇能够抑制核转录因子 C-Jun 的核转位。 为进一步探索白藜芦醇对于类风湿性关节炎的潜在治疗作用，我们用胶原蛋 白免疫DBA1 小鼠构建CIA 动物模型，通过灌胃给予小鼠白藜芦醇20mg/kg/day， 观察CIA 小鼠的临床发病率及病情严重程度，并通过病理切片观察炎症浸润情况， 发现白藜芦醇处理组 CIA 发病减轻，表现为肿胀减小、发病率减少、炎症细胞侵 润减少。提示白藜芦醇在类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的治疗中可能发挥重 II 要作用。 关键词：白藜芦醇（resveratrol ），sirt1，T 细胞活化，乙酰化，C-Jun ，CIA 模 型 作 者：邹 婷 指导老师：张进平 III Abstract The role and Mechanism of Resveratrol on Inhibiting CD4+ T Cell Activation The role and Mechanism of Resveratrol on Inhibiting CD4+ T Cell Activation