PTEN在正常脑组织和胶质瘤中的表达和意义.pdfVIP

Classified Index： CODE ：10075 U.D.C ： NO. A Dissertation for the Degree of M. Surgery Expression And Clinical Significance Of PTEN In Normal Brain Tissue And Gliomas Candidate: Chen yan Supervisor: Prof. Wang hong Academic Degree Applied for: Master of Medicine Specialty: Surgery University: Hebei University Date of Oral Examination: May, 2012 摘 要 摘 要 目的：通过对 PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10 即第10 号染色体缺失的与张力蛋白同源的基因)在正常脑组织以及人脑胶质瘤中采用反 转录PCR法(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)和免疫组化法(S-P法) 分别在基因、 分子及组织水平进行分析，进一步探讨 PTEN 与胶质瘤恶性程度之间的关系，为胶质瘤 的诊断和治疗提供理论和实验依据。 方法：收集河北大学附属医院神经外科2010年2月～2012年01月胶质瘤病人住院 行手术治疗的病理标本38例，同时收集了10例颅脑外伤行内减压术的正常的脑组织标 本。所有胶质瘤及正常脑组织标本未经生理盐水浸泡，采集后立即置液氮10min,后转-80 ℃冰箱长期冻存备用。所有病理标本按最新的WHO星型胶质瘤分级标准分级，Ⅰ级4例, Ⅱ级 13 例，Ⅲ级 15 例,Ⅳ级 6 例,其中Ⅱ级以下划为低级别组,Ⅲ级^Ⅳ级为高级别组; 所有肿瘤标本及病理级别均经由河北大学附属医院病理实验室诊断证实。本研究通过采 用反转录 PCR(RT-PCR)、免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学(S-P 法)方法分别检 测PTEN mRNA及其蛋白产物在人脑胶质瘤及正常脑组织中的表达情况。 结果： 免疫组织化学实验：正常脑组织阳性表达率为100%；高级别组阳性病例16 例，阳性表达率35.29%；低级别组阳性病例6例，阳性表达率76.19%；免疫印迹实验： 低级别组蛋白表达量为 0.579±0.192，高级别组蛋白表达量为 0.197±0.069；反转录 PCR 实验：低级别组 mRNA 表达量为 2.997±0.593，高级别组 mRNA 表达量为 1.237±0.253；以上实验证实 PTEN 在基因、分子和组织水平表达一致，在正常脑组织 中的表达高于胶质瘤，且不同恶性程度的胶质瘤之间 PTEN 表达量也不相同，且随着胶 质瘤级别的增高,PTEN的表达量逐渐下降。PTEN在正常脑组织与不同恶性程度的胶质瘤 之间以及不同恶性程度的胶质瘤之间的表达差异经统计学分析有统计学意义 (P0.01)。 结论：本课题在人脑胶质瘤及正常脑组织中同时应用三种试验方法分别在基因、蛋 白和组织水平检测了PTEN的表达情况并分析了PTEN及其表达产物与胶质瘤级别的相关 性。研究发现，PTEN 在正常人脑组织中呈强阳性表达，主要表达于细胞核;不同级别的 I 摘 要 胶质瘤 PTEN 的表达阳性率各不相同，随着胶质瘤病理级别的升高，PTEN 的阳性表达率 呈明显下降趋势，这表明 PTEN 的表达阳性率与胶质瘤的病理级别呈负相关性，且病理 级别越高的胶质瘤病人