牛血铜锌超氧化物歧化酶规模化生产工艺的研究.pdfVIP

第一章 前言 1．1研究目的和意义 随着我国集约化养殖业的发展，动物咀液资源日盏丰富，目前国内对动物血液利用率很低， 主要用来制备纯血粉或发酵血粉。其中牛血占了很大的比例，但都难以产业化。根据国家统计局 均一头肉牛产12kg血液计算pJ，我国每年可获得56．44万吨牛血。然而，我国人多数肉牛屠宰场 中，牛血利用率不高，附加值低，有的直接排放到环境中，造成了环境污染。由于牛红细胞没有 被充分利用，这造成血产品的成本较高，因此，牛血综合利用问题的焦点集中在红细胞的开发上， 本课题的意义就是将这部分被废弃的血球利用起来，向上厂化、无公害化、商品化、高效化发展， 走综合利用的路子，物尽其用，变废为宝，充分发挥废弃物资源化的作用。 超氧化物歧化酶(Superoxide 以来，人们相继从牛、猪、葶、马等动物红细胞、肌肉、肝脏组织以及植物中分离和纯化出SODl” q；此酶属金属酶，广泛存在于动植物、微生物的细胞中po…。至今已建立了一整套快速而有效 的分离及分析方法，并对它的化学、药理、临床及其作用机理进行了一系列的研究，发现SOD 的存在可能与机体的衰老、肿瘤发生、自身免疫性疾病和辐射防护等有关。目前SOD临床应用 集中在自身免疫性疾病上，如类风湿关节炎、红斑狼疮、皮肌炎、肺气肿等；也IE}j于抗辐射、抗 肿瘤、治疗氧中毒、心肌缺氧与缺血再灌注综合症以及某些心血管疾病。动物血来源的SOD重 要意义在于对人体抗炎的有效性，而人SOD有时反而无效。有研究证明，牛SOD在很低的剂量 就有抗炎作用，此因注射的SOD中的一部分结合于细胞壁外的半特异性位置，从而防止自由基 的进攻”“，这种异源性SOD可为膜所崮定，从而比细胞外的游离酶更有效，同源的人SOD不被 这些膜受体所识别，故不能发挥其活性IJ“。SOD不仅在临床上大显身手，而且近几年来又被广 泛地应用于日用化工行业及食品、保健品行业。含有SOD的化妆护肤品，对抗衰老及去面部雀 斑等有显著作用Il“。随着SOD被J“泛廊用于化妆品、食品及保健品行业等领域及活性氧、疾病 诊断和抗辐射等方面的研究，生产SOD大有发展前途。 SOD纯化制各方法各异，常用方法有经典法、离子交换法、疏水色谱法、凝胶过滤法和金属 螯合亲和层析法等。但大多以实验室制各为主，生产成本高、不宜工业化规模生产。本文以牛红 细胞为原料，在前人工作的基础上，通过多次重复试验与研究，建立了红细胞连续分离技术，并 证明冷冻红细胞和新鲜红细胞制各的SOD在收率、纯度、比活等方面无明显著别；通过铜锌盐 存在下的热变性去除血红蛋白，可省去传统工艺中所用的火量氯仿和乙醇；利用超滤技术浓缩提 取液可大幅度减少丙酮用量；通过离子交换法进一步纯化了SOD；从而确立了新的SOD工业化 生产：制各方法．实现低成本、高效益、高纯度的牛血超氧化物歧化酶工、Ik规模化生产。 1．2国内外研究进展 1．2．1牛血的综合利用 最初，生化药物人多数来自动物的脏器。由丁制药学的发展，原料来源不断扩大，已经不仅 仅限于动物脏器，但脏器来源的药物仍占重要地位和相当的比例。从20世纪开始研究脏器药物 防治疾病的机制之后，更促进了脏器生化约物的发展。动物来源的生化原料药物现已有160种左 右，主要来自丁猪、牛、羊、家禽等。利崩牛血可以提取各种生化药品及生化制晶，如：水解蛋 白及各种氨基酸、纤溶酶、SOD、凝血酶、血红蛋白、血红素、血球素(Orgotin)、原卟啉、血 血粉等。口前，我国大部分规模化屠宰场利用牛血情况见表1—1。SOD作为一种新型药用酶， 不仅在医药界而且在化妆品、食品、保健品行业被广泛应用，发展前景十分广阔。牛血经分离后， 红细胞里提取SOD，血浆里提取凝血酶，SOD提取过程中的副产品吡渣可用于饲料添加剂，从 而能够大幅度提高牛血的综台利用价值和经济效益。 表1—1屠宰场牛血综合利用情况表 产 品 提取部分 用 途 血粉 血液 饲用m粉 饲料用 [业用血粉 牯合剂、稳定剂、抛光剂、催化剂 微生态血粉 营养保健 血酪素 血浆 可做产塑胶 SOD