TNF-α及CD44在SD大鼠分泌性中耳炎的表达及意义.pdfVIP

TNF．Q与CD44在SD大鼠分泌性中耳炎的表达及意义 摘 要 media with 目的：分泌性中耳炎(0titis effusion，0ME)是以 鼓室积液为特征的慢性非化脓性炎症，其发病机制目前尚不明确，通 常认为与咽鼓管机械性阻塞、感染、免疫反应有关。本实验通过建立 变化，探讨TNF—Q与CD44在0ME发生、发展中所起的作用。方法： 成年健康SD大鼠40只，设立正常对照组、手术对照(PBS)组、0ME 模型组三个实验组。正常对照组选SD大鼠4只，不作任何处理，直 接取听泡表面粘膜及听泡灌洗液检测；手术对照(PBS)组选用SD大 鼠16只分别在中耳腔内注射磷酸缓冲液(PBS)，按2天、4天、7天、 15天四个不同时间点处死SD大鼠后取听泡灌沈液和听泡粘膜组织检 相对应，按四个不同时间点取听泡粘膜组织及大鼠听泡灌洗液行检测 (各时间段均多选入一只SD大鼠，以防出现造模过程中动物死亡所致 实验动物数量不够之情况)。听泡灌洗液运用ELISA法检测各组中肿 瘤坏死因子(TNF-Q)浓度。听泡粘膜组织通过固定、包埋制成切片， 运用HE染色法查看各组大鼠听听泡粘膜组织细胞的形态学改变，采 用免疫组化SP法检测听泡粘膜中粘附分子CD44及TNF—Q在不同实 Plus 验组中的阳性表达，用Image-Pro6．0多媒体彩色病理图像分 析系统进行分析，统计学分析得出实验结论。结果：1、采用ELISA 法对正常对照组听泡灌洗液中的TNF—a浓度进行检测，其平均浓度 1 天左右最高，其后逐渐减轻，在15天时，炎症因子降至最低点。以 a=0．05为检验标准，做组间配对t检验，OME实验组与正常对照组和 TNF—Q的浓度在OME实验组显著高于对照组。2、HE染色切片可见， 正常对照组听泡粘膜无炎症改变；手术对照(PBS)组术后2天、4 天、7天、15天均未见听泡粘膜上皮细胞有明显改变，仅粘膜下有少 量炎症细胞浸润；OME实验组术后两天可见听泡粘膜水肿，炎性细胞 浸润，其中有大量中性粒细胞。术后四天组见毛细血管扩张，炎性细 胞浸润增强，以大量中性粒细胞为主。术后七天组可见上皮下间隙增 宽，更多的炎性细胞浸润，仍以大量中性粒细胞为主。术后15天组 出现成纤维细胞增生，新生血管增多，并可见到单核巨噬细胞浸润， 中耳粘膜明显增厚的改变。3、免疫组化SP染色，正常对照组TNF- a和CD44均在粘膜上皮及上皮下结缔组织仅少量表达。手术对照 化，且四个时间点之间表达强度和阳性细胞数无明显差异(PO．05)， 无统计学意义。OME实验组听泡粘膜上皮细胞和粘膜下结缔组织中均 有TNF—a和CD44阳性表达，尤其在杯状细胞及粘膜下混合腺强烈表 Plus 。 达，其术后15天强烈表达。经Image—Pro6．0检测双侧听泡粘 膜阳性细胞灰度值，使用SPSSl3．0采用组间t检验、相关性分析。 达经统计学分析发现：OME实验组与对照组间两种因子的表达强度有 无明显差异(PO．05)，无统计学意义。结论：l、在OME大鼠模型急 性期，鼓室积液的中TNF—Q浓度与炎症的严重程度密切相关。2、TNF- Q介导炎症反应的方式可能是激活中性粒细胞。在这一过程中，粘附 ： 分子CD44参与了中性粒细胞的粘附，其中TNF-Q的表达依赖中性粒 液发生、发展中起重要协同作用。 关键词：分泌性中耳炎：鼓室积液；肿瘤坏死因子；粘附分子 and ofTNF—QandCD44in Expressionsignificance modelof MediawithEffusion Rat Otitis mediawith achronic