基于高通量测序的寒地沼气池微生物群落解析-哈尔滨工业大学学报.pdfVIP

第４６卷　 第４期 哈　 尔　 滨　 工　 业　 大　 学　 学　 报 Ｖｏｌ４６ Ｎｏ４ 　 　 ２０ １４年４月 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＨＡＲＢＩＮ ＩＮＳＴＩＴＵＴＥ ＯＦ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ Ａｐｒ． ２０１４ 　 　 　 　 　 　 基于高通量测序的寒地沼气池微生物群落解析 １，２ １，２ ３ ４ ４ １，２ 赵　 光 ，马　 放 ，孙　 婷 ，李树本 ，游　 空 ，赵　 贞 （１． 哈尔滨工业大学 城市水资源与水环境国家重点实验室，１５００９０ 哈尔滨；２． 哈尔滨工业大学 市政环境工程学院， １５００９０ 哈尔滨；３． 辽宁工业大学 化学与环境工程学院，１２１００１辽宁锦州；４． 海林农场，１５００００ 黑龙江 牡丹江） 摘　 要：为实现寒地沼气发酵系统高效、稳定运行，应建立基于沼气发酵微生物群落的复合调控策略．本研究耦合４５４ 高 通量测序和ＰＣＲ⁃ＤＧＧＥ分析方法，对北方规模最大的海林农场沼气池内细菌及产甲烷古菌群落结构进行解析．取沼气池 稳定运行期沼液样品，分析系统内微生物群落多样性．结果显示，共获得１２９７条高质量微生物序列，在属和种的分类水 平上，至少存在５８１个细菌属和６６６ 个细菌种．优势菌群有Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ 及Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ，相对丰度分别为 ４６３９％、２１４１％和１８９８％．优势属（相对丰度＞５０％）包括Ｐｒｏｔｅｉｎｉｐｈｉｌｕｍ、Ｓｐｉｒｏｃｈａｅｔａ和Ｗｏｌｉｎｅｌｌａ．ＤＧＧＥ分析结果表明， 产甲烷古菌包括Ｍｅｔｈａｎｏｃｏｒｐｕｓｃｕｌｕｍ ｓｐ．、Ｍｅｔｈａｎｏｓａｅｔａ ｓｐ．、Ｍｅｔｈａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．及Ｍｅｔｈａｎｏｓａｒｃｉｎａ ｓｐ．．，表明沼气池的产 甲烷途径以乙酸代谢类型为主，水解、酸化过程主要由来自动物消化系统内的细菌完成． 关键词：沼气；微生物群落；海林农场；牛粪；４５４ 焦磷酸测序技术 － － － 中图分类号：Ｘ７０５ 文献标志码：Ａ 文章编号：０３６７ ６２３４（２０１４）０４ ００３６ ０７ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｉｎ ａ ｆｕｌｌ⁃ｓｃａｌｅ ｂｉｏｇａｓ ｄｉｇｅｓｔｅｒ ｏｆ ｃｏｌｄ ｒｅｇｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ｈｉｇｈ⁃ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １，２ １，２ ３ ４ ４ １，２ ＺＨＡＯ Ｇｕａｎｇ ，ＭＡ Ｆａｎｇ ，ＳＵＮ Ｔｉｎｇ ，ＬＩ Ｓｈｕｂｅｎ ，ＹＯＵ Ｋｏｎｇ ，ＺＨＡＯＺｈｅｎ （１．Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂ ｏｆ Ｕｒｂａｎ Ｗａｔｅｒ Ｒｅｓｏｕｒｃｅ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，Ｈａｒｂｉｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１５００９０ Ｈａｒｂｉｎ，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｕｎｉｃｉｐａｌ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈａｒｂｉｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１５００９０ Ｈａｒｂｉｎ，Ｃｈｉｎａ； ３．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１２１００１Ｊｉｎｚｈｏｕ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ；