白藜芦醇对高糖培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞P27kip1表达的影响和机制研究.pdfVIP

中文摘要 白藜芦醇对高糖培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞 p27瞄P1表达的影响及机制研究 摘 要 目的：糖尿病(diabetes 糖尿病大血管并发症包括高血压、冠心病、脑血管疾病及周围血管疾病， 是糖尿病患者死亡的首要原因。与非糖尿病患者相比，糖尿病心血管疾病 死亡的风险增加3倍，脑死亡的风险增加2倍，截肢的危险增加5倍。糖 尿病并发症最终成为糖尿病的主要问题。然而，在诊断糖尿病时，约1／4 smooth AS)是大血管并发症的基本病理改变，血管平滑肌细胞(vascular musclecells．VSMCs)的增殖在动脉粥样硬化发展过程中起着关键作用。 流行病学研究显示，尽管法国南部居民有高脂饮食的习惯，但是因为 发生率和死亡率远远低于其他有相似饮食习惯的西方国家，这就是著名的 “法兰西悖论(French paradox)。白藜芦醇是红葡萄酒中含量很高的一 种非黄酮类多酚化合物，是植物在应激状态下产生的一种抗毒素，具有广 泛的生物和药理学作用，包括抗氧化应激、抗炎、心血管保护作用、降低 血糖、改善胰岛素抵抗、调节脂质代谢、免疫调节、抗肿瘤、抗衰老及雌 激素样活性等等。白藜芦醇可通过影响脂蛋白氧化、VSMCs增殖、血小 板聚集、炎症反应等多种机制，对动脉粥样硬化起到防治作用。 kinaseinhibitor， 研究显示，细胞周期素激酶抑制剂(cyclin-dependent CKI)p27酬P可通过调控细胞周期的进程影响动脉粥样硬化的发生发展。 细胞周期进程受细胞周期调节蛋白(cell cycleregulatingprotein，CCRP) 的精密调控，包括正性调节蛋白和负性调节蛋白。p27bPl作为一种负性调 节蛋白，在G1晚期减少，使细胞顺利通过Gl／S期限制点进入S期，完成 细胞增殖。本实验通过研究白藜芦醇对大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖、 p27“P1蛋白表达的影响，探讨糖尿病大血管并发症的发病机制及白藜芦醇 的药理作用。 中文摘要 实验方法： 1．采用细胞培养的方法：以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株A7r5(细胞株 购自中国培养物典藏中心)为研究对象。将冻存的血管平滑肌细胞株迅速 投入37℃温水中，同时摇动冻存管使快速解冻，解冻后800转／min离心5 ml混匀，接种于培养 rain，弃上清，加入含20％FBS的DMEM培养基5 瓶中，放于37℃、5％C02孵箱中孵育，待细胞铺满瓶底的90％后进行传 代。取处于对数生长期的细胞分别接种于50“培养瓶和96孔培养板培 养24小时，后更换于无血清DMEM培养基培养24小时，使细胞处于饥 饿状态并同步于GJGl期，然后分7组进行实验： mmol／L葡萄糖 ①正常对照组(contr01)：5．5 G)：25 ②高糖培养组(25 mmol／L葡萄糖 mmol／L葡萄糖+19．5mmol／L甘露 ③甘露醇对照组(Mannit01)：5．5 醇 25 R组(25G+25Res)： ‘④高糖+25 mmol／L葡萄糖+25 pmol／L白藜 芦醇 G+50Res)：25 R组(25 mmol／L葡萄糖+5