亚麻籽木酚素含量的测定.docVIP

ICS点击此处添加ICS号 点击此处添加中国标准文献分类号 DB 地方标准 DB XX/ XXXXX—XXXX 亚麻籽木酚素含量的测定 Linseed lignans content determination of liquid chromatography 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识 XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 内蒙古自治区质量技术监督局发布 前言 本标准由内蒙古自治区农牧业科学院资源环境与检测技术研究所提出。 本标准起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院资源环境与检测技术研究所。 本标准主要起草人：冯小慧、姚一萍、郝星、李国银、张福金、邵文捷、王秋渝、狄彩霞、李秀萍、任超、连海飞、莎娜、张欣昕、王丽芳。 亚麻籽木酚素含量的测定 1 范围 本标准规定了亚麻籽木酚素含量的液相色谱测定方法。 本标准适用于亚麻籽木酚素含量的测定。 本方法检出限：0.0029g/100g; 2 原理 试样经无水乙醚脱脂，乙醇溶液回流提取木酚素，碱解，调酸，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱法分离，根据保留时间定性和峰面积比较进行定量。 3试剂 3.1 无水乙醚。 3.2 60%乙醇溶液。 3.3 1.8mol/L氢氧化钠溶液。 3.4 盐酸：优级纯。 3.5 甲醇：色谱纯。 3.6 去离子水。 3.7 甲醇水溶液：甲醇+水=40+60 3.8 木酚素标准储备液：准确称取木酚素标准品15.0mg,用甲醇溶解并转移至10mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度，得浓度为1500.00μg/ mL的木酚素标准储备液,于-20℃条件下贮存，备用。 3.9 木酚素标准工作溶液：使用前，将储备液用甲醇水溶液（3.7）稀释，工作曲线浓度为10μg/ mL、25μg/mL、50μg/mL、75μg/mL、100μg/mL、120μg/mL，上机备用。 4 仪器 4.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器。 4.2 电子天平：感量0.1mg和0.01g。 4.3 高速离心机，配50 mL离心管。 4.4 旋转蒸发器，配250 mL茄形瓶。 4.5 样品研磨机。 4.6 加热回流提取装置，配250 mL三角瓶。 4.7 一次性医用注射器。 4.8 聚四氟乙烯微孔滤膜：孔径0.45μm。 4.9 恒温水浴振荡器。 4.10 自然对流烘箱。 4.11 备有变色硅胶的干燥器。 4.12 索氏提取器。 5 操作方法 5.1 样品处理 将亚麻籽用样品研磨机磨碎，密封备用。 5.2 分离纯化 5.2.1 提取 准确称取样品1.00g于滤纸筒（直径2cm，高约7.5cm）内,置于索氏提取器中，用无水乙醚浸泡12小时后，再用索氏提取器加热回流提取8小时。取出样品(连同滤纸筒)，在室温通风条件下放置5小时，在105±5℃下烘2小时后，取出，放入干燥器中，冷却至室温。打开滤纸筒，将样品置于250 mL三角瓶中，加入15mL乙醇溶液（3.2），在50℃条件下回流提取4小时。将提取液和残渣转入离心管中，以6000r/min离心10min，取上清液，向残渣中加入15mL 60%乙醇溶液，重复上述操作一次，合并上清液，待纯化处理。 5.2.2纯化 向提取液中加入10 mL氢氧化钠溶液(3.3)，在40℃条件下振荡碱解40min 。用盐酸调pH至4-6 ，过滤，将滤液移入茄形瓶中，45℃真空浓缩至近干。用甲醇水溶液（3.7）溶解并定容至200 mL，摇匀，过膜（4.8），待上机分析。 5.3 测定 5.3.1 色谱条件 色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm，柱填料粒径5μm。 流动相：甲醇+水=40+60。 柱温：35℃。 检测波长：290nm。 流速：1.0 mL /min。 进样量：20μL。 5.3.2 色谱分析 取20μL样品溶液和相同体积的标准工作溶液，分别注入高效液相色谱仪，根据保留时间定性，外标法峰面积定量。 6 结果计算 样品中木酚素的含量按式（1）进行计算。 ……………(1) 式中： X—样品中木酚素的含量，单位为克每百克（g/100g）; C—样液中木酚素的检出浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； m—称样量，单位为克（g）。 计算结果保留三位有效数字。 7 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 8 色谱图 木酚素标准溶液色谱图见图1，亚麻籽中木酚素提取液色谱图见图2。 图1 木酚素标准溶液色谱图 图2 亚麻籽中木酚素提取液色谱图 _________________________________ DBXX/ XXXXX—XXXX 4