蝴蝶兰组培探究进展.docVIP

蝴蝶兰组培探究进展 　摘　要：蝴蝶兰采用组培快繁技术进行种苗繁殖，概述了我国蝴蝶兰组培快繁技术的研究进展，分别论述了无菌种、外植体、基本培养基、激素及其不同光谱的的选择对蝴蝶兰组培过程中的诱导、增殖、生长的影响， 以及如何减轻外植体褐变问题等， 以期为蝴蝶兰的大规模生产提供参考，并分析了国内对蝴蝶兰组培快繁研究途径中存在的不足。 关键词：蝴蝶兰； 组培； 快繁； 研究进展 蝴蝶兰，兰科蝴蝶兰属植物，属热带、亚热带气生兰。原产于菲律宾、印度尼西亚、泰国、马来西亚和我国台湾等地，其株型美观、花形奇特似蝶、枝叶繁茂， 花朵硕大、花色鲜艳、花期持久，观赏价值极高， 在热带兰中素有“兰花皇后”的美誉，有较高的观赏和经济价值，深受国内外花卉市场的欢迎。但是，由于蝴蝶兰是单茎性气生兰， 植株很少发育侧枝， 很难采用常规分株方式进行无性繁殖。 其种子也不含胚乳或其他组织， 在自然条件下萌发率极低， 因此无法利用播种方式进行有性繁殖。而采用组织培养方法进行种苗繁殖是目前蝴蝶兰大规模生产的唯一途径。蝴蝶兰快速繁殖的途径主要是利用无菌播种和利用各种类型的外植体诱导类原球茎， 进而诱导分生苗实现快繁， 不用通过诱导愈伤组织而直接分化丛生芽。 1蝴蝶兰组培快繁的影响因素 1.1无菌播种途径 蝴蝶兰种子的胚发育不完全，不易发芽，用人工合成的培养基促使种子无菌萌发，可以得到较高发芽率。种子培养过程中使用的培养基有KC、MS、花宝等，其中改良KC 培养基是蝴蝶兰种胚萌发的理想培养基。对不同无菌播种方法包括撒播法、涂布法、稀释法进行了比较，结果表明稀释法较好，种子分布均匀，利用率高，明显减少转接次数，且原球茎发育健壮整齐【1】。果龄采收期也影响着无菌播种效果。 也可采用无菌播种途径快繁蝴蝶兰，能够在短期内获得大量幼小植株，且技术简单、成本较低，是现阶段经济有效的快速繁殖方法，也是工厂化育苗的重要途径【2】。但由于蝴蝶兰种子苗是一种杂交品系，因此后代变异率高，除了少数自花系列较稳定以外，难以形成品质均一的大规模栽培品种。因此，在采用无菌播种进行蝴蝶兰种苗生产时，要对父母本进行严格的选择，以确保后代性状的尽可能一致。 1.2类原球茎途径 原球茎是兰科植物组织培养产生的特有现象，通过离体器官诱导原球茎快繁法获得试管苗基本一致，增殖系数较高，变异性较少，适合大规模繁殖，是兰花组培快繁的一个主要形式。 近年来， 国内外学者对蝴蝶兰的组织培养技术进行了大量研究， 蝴蝶兰组织培养诱导原球茎的外植体有茎尖、叶片、花梗腋芽、花梗节间切段等诱导类原球茎， 进而诱导分生苗实现快繁。 蝴蝶兰的繁育方法有两种丛生芽和原球茎增殖。原球茎增殖容易出现变异，采用丛生芽增殖能够很好的保持原有品种的特性【3】。还可利用花梗腋芽、叶片等作为外植体接种在不同培养基上进行离体培养，再利用诱导产生的不定芽的茎尖进行茎尖培养，可得到大量的原球茎状体【4】。由于茎尖作外植体诱导原球茎诱导率、周期性，但损伤母株，而且还会有不同程度的污染率【5】，故利用腋芽萌发的不定芽的幼叶为外植体，虽然诱导率稍低，但大大降低了污染率。 大量研究表明， 在蝴蝶兰进行组织培养过程中， 选取的外植体不同， 原球茎的诱导率也有很大差异， 其中幼叶、茎尖、花梗腋芽是蝴蝶兰原球茎诱导的较佳外植体， 叶片和根段的诱导效果最差。但是，采用茎尖作外植体会对植株造成损伤，因此蝴蝶兰的组织培养通常以幼叶或花梗腋芽为外植体。 1.3培养基的选择与激素的添加 蝴蝶兰组织培养采用的基本培养基有MS、1/2MS、VW、B5、KC、花宝及其改良型等。在原球茎的诱导过程中，不同的蝴蝶兰品种和外植体对最适培养基的选择有所不同，其中以MS基本培养基最为常用，且适当减少培养基中大量元素和部分微量元素的添加量有利于原球茎的增殖。 一般情况下，原球茎在基本培养基上即可增殖、分化，但在基本培养基中附加适量激素或其他添加物可显著促进原球茎的增殖与分化。目前，在蝴蝶兰组织培养中常用的激素有GA3、6 - BA、NAA、2， 4 - D 和IAA等。 蝴蝶兰组织培养中不同阶段对培养基和激素配比的要求也不同【6】。蝴蝶兰无菌播种诱导胚状体以MS7为基础培养基，添加100 g/L新鲜土豆汁效果较好，有利于原球茎的分化和生长。在诱导胚状体时激素浓度要求较低，在胚培养时，只加MS培养基的部分成分即可，添加细胞分裂素和生长素易使胚生长畸形或抑制胚的生长。并在MS7培养基中，随着NAA浓度的升高，生根率呈现先升后降的趋势，单独使用NAA诱导生根，浓度以0.5 mg/L为好，高浓度BA抑制生根。因此，诱导蝴蝶兰生根的较为理想的激素配比为BA0.1 mg/L+NAA0.5 mg/L，植株生根率高，根数多，生根长。 利用已过盛花期带休眠芽的花梗作为外植体材料，通过对不