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生物化学综合实验 实验报告项目名称：核酸的分离纯化及性质研究指导老师：商亚芳 班 级：食品科学与工程类13-04班 姓 名：刘澎学 号： 2013218669 日 期： 2015/07/02-07/03 小组成员：刘澎徐成合肥工业大学核酸的分离纯化及其性质研究摘要：为了提取植物组织和动物肝脏中的DNA，我们先破碎了细胞，提取了脱氧核糖和蛋白（DNP），再将蛋白质去除。然后利用阴离子去垢剂SDS使DNA与蛋白质进行分离，用氯仿-异戊醇去蛋白质蛋白质变性，然后离心除去变性蛋白质，最后用乙醇把DNA从抽提液中沉淀出来。将提取出来的粗DNA进过多次纯化，再利用DNA紫外吸收特性测定DNA的纯度时发现提取出来的DNA纯度比较低。之后通过琼脂糖凝胶电泳分离DNA，最后通过紫外线观察所跑出来的条带发现其中一条带并不是很清晰。Abstract：Inorder to extract DNA from plant tissues and animal liver, we first break the cells and extracted the DNA and protein (DNP), and then removed the protein. Then using anionic detergent SDS to protein and DNA were separated.Use alcohol Mixture to make protein denaturation,and then place it on the centrifugal machine to remove the protein , finally with ethanol and the DNA precipitated from the extract.We extract the crude DNA into a number of purification, and then use the DNA UV absorption characteristics of DNAs purity was found to extract the DNA purity is higher..We were finally separated by agarose gel electrophoresis of DNA, and the last one of the bands was found to be not very clear.关键词：核酸分离 提取 纯化电泳Key words：DNA Separate extraction purification electrophores前言：核酸（nucleic acid）是遗传信息的携带者，是基因表达的物质基础。核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一。核酸广泛存在于所有动植物细胞微生物体内，生物体内的核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。核酸是生物体内的一种大分子化合物，与生物的生长、发育、繁殖、遗传与变异有密切关系，是蛋白质生物合成不可缺少的物质，因此，核酸的提取一直应用于遗传工程上。目前,人们已发现,除了遗传学上的用途外,核酸制剂还可广泛应用于医学、食品工业上，核酸及其衍生物具有有效的抗癌作用。所以核酸的分离纯化，一直广受大家的关注，本次试验就是以植物和动物作为实验材料，来进行核酸的分理纯化及性质研究。植物组织中核酸的分离与纯化原理： DNA存在于细胞的细胞核中，且DNA大部分是以脱氧核糖和蛋白的形式存在于其中。所以为了提取植物组织和动物肝脏中的DNA，我们先提取了脱氧核糖和蛋白（DNP），再将蛋白质去除。然后利用阴离子去垢剂SDS使DNA与蛋白质进行分离，再用含少量异戊醇的氯仿去除蛋白质，最后用乙醇把DNA从抽提液中沉淀出来。DNP与核糖核蛋白（RNP）在不同浓度的电解质溶液中溶解度差别非常大，我们可以利用这一特点将二者进行分离。通常可用1mol/LNaCl提取DNA。为了进一步纯化DNA,我们可用适量的RNase来处理提取液，从而降解DNA中掺杂的RNA.因为在提取过程中DNA可能被细胞中释放出来的DNase 分解或者DNA发生变性，所以整个提取过程都应该在较低的温度下进行，同时研磨缓冲液中加入柠檬酸三钠和Na2-EDTA抑制DNase的活性。我们一般要通过紫外吸收，化学测定和电镜观察等方面来测定提取的DNA是否为纯净，双链，高分子化合物。本实验采用紫外吸收法。肝脏中DNA的提取及纯度鉴定原理：本实验采用动物新鲜肝脏为提取DNA的材料，通过组织匀浆，使细胞破碎，利