实时荧光定量CR检测RAD9基因在结直肠癌组织中的表达意义.pdfVIP

中文摘要 实时荧光定量PCR检测RAD9基因在结直肠癌组织中 的表达意义 摘 要 目的：结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一，位居全球恶性肿瘤发 病率第三位，在我国恶性肿瘤中其发病率占第四位。近年来随着人民生活 水平不断升高，饮食结构和饮食习惯的改变及人口老龄化，结直肠癌的发 病率在逐渐上升。目前，结直肠癌的确切病因尚未完全清楚，随着分子生 物学的快速发展，人们普遍认为结直肠癌的发生、发展是一个多因素、多 阶段的复杂过程，是遗传因素和环境因素共同作用的结果，涉及多基因改 变的累积过程，如癌基因的激活，抑癌基因和错配修复基因(mismatch repair，MMR基因)的突变及失活，特别是抑癌基因的失活在其中发挥重 要作用。 RAD9基因首先是在裂殖酵母突变体中被发现，是一个进化上高度保 守的基因，RAD9基因属于DNA损伤反应系统(DNA damageresponse) 中的一个重要成员。该系统负责应对各种DNA损伤，起到维护基因组稳 定的作用。很多研究表明，RAD9基因参与细胞周期检测点检测、DNA损 伤修复和细胞凋亡，在维持基因组稳定性和抑制肿瘤细胞增殖方面起到重 要作用，因此，RAD9基因可能是一种抑癌基因。有研究表明，RAD9基 因在皮肤癌、胃癌等恶性肿瘤中表达水平下降，这也提示RAD9基因和 恶性肿瘤的发生、发展密切相关。为了探讨RAD9基因在结直肠癌中发 flurecence 挥的作用，本文通过利用实时荧光定量PCR(real．time quantitive chain mRNA在结直肠癌 reaction，FQ．PCR)技术检测RAD9 polymerase 组织中及癌旁正常组织中的表达水平，并结合临床病理资料，探讨RAD9 基因与结直肠癌之间的关系，为研究结直肠癌发生、发展的原因及临床诊 治提供一定的理论依据。 方法： 选取42例结直肠癌病人的癌组织及相应的癌旁正常组织(距癌缘 lOcm)，采用实时荧光定量PCR技术检测结直肠癌组织中及癌旁正常组 织中RAD9mRNA的表达水平，以GAPDH作为内参标准，对比观察结 l 中文摘要 直肠癌组织和正常组织之间的表达差异，并结合卫生部结直肠癌诊疗规范 (2010版)，将实验数据按照临床病理特点进行分层分析，实验结果采用 统计软件SPSS13进行统计学分析，以P0．05认为差异有统计学意义。 结果： 1 RAD9 mRNA在结直肠癌组织和正常组织中均有不同程度的表达， 其中85．71％(36／42)结直肠癌组织中RAD9mRNA表达水平比相对应的 正常组织表达水平降低。经过数据处理后结直肠癌组织中RAD9mRNA 义(P0．05)。 2结直肠癌组织中RAD9mRNA表达水平与患者性别、年龄、肿瘤 大小、部位无关，差异无统计学意义(PO．05)。 3有淋巴结转移的结直肠癌组织RAD9mRNA的相对表达量 有统计学意义(PO．05)。 4TNM(III期+Ⅳ期)的结直肠癌组织RAD9mRNA相对表达量 异有统计学意义(PO．05)。 5结直肠癌组织中RAD9 mRNA表达水平随着肿瘤分化程度的降低 而呈下降趋势，经统计学分析，不同分化程度的组别之间差异有统计学意 mRNA的相对 义(PO．05)，组间比较显示：高分化结直肠癌组中RAD9