尿酸盐晶体形态学和果糖对尿酸转运子影响的研究.pdfVIP

I I／llI／I／I／／II／II／f／／lllo／／I／／／／l-l／／llo／I／嬲5ll／／0／ll／ 参考文献…………………………………………………………………………………．．46 综述…………………………………………………………………………………………………………………．48 致谢…………………………………………………………………………………………………………………．58 攻读学位期间发表的学术论文……………………………………………………………59 原创性声明…………………………………………………………………………．．60 尿酸盐晶体形态学及果糖对尿酸转运子影响的研究 研究生： 崔佳佳 专 业： 内科学 导 师： 苏厚恒教授 中文摘要 目的 1．尿酸盐晶体是引起痛风性关节炎急性发作的物质基础，通过观察尿 酸盐晶体在不同pH值环境中的形态变化，探讨体液及尿液pH值对防止尿 酸结石的形成和促进体内尿酸排出的意义。 2．尿尿酸盐晶体是尿酸在尿液中处于过饱和状态的标志，通过检测痛 风患者尿液尿酸盐结晶，探讨痛风患者尿液尿酸盐结晶对痛风早期诊断和评 价病情的临床意义。 3．hURATl基因是调节肾脏尿酸重吸收的重要基因，通过观察不同浓度 果糖影响尿酸排泄的途径。 方法 1．采集痛风病人痛风结节中的尿酸盐晶体，应用偏振光显微镜观察晶 体形态，以证实其结晶为尿酸盐结晶。将尿酸盐晶体200ul置于试管中，加 pH值为5．5的缓冲液，调尿酸浓度为8．0mg／dl，37C水浴30分钟，在偏振 光显微镜下，观察尿酸盐晶体在此pH值环境下的形态。以同样的方法，依 冲液，观察尿酸盐晶体在不同的pH值环境下的形态变化。 2．选择痛风患者56例，B超显示无肾结石，健康对照23例。分别采 集其晨尿50ml，离心取其沉渣，应用偏振光显微镜观察尿沉渣中的尿酸盐结 晶形态。 3．按照培养液中所含不同的果糖浓度，将HK一2细胞培养组分为：①单 u 纯用DMEM／F12培养基组(对照组)：②采用DMEM／F12培养基+100mol果糖组 u (Fl组)：③采用DMEM／F12培养基+500mol果糖组(F2组)。每组分别培养8 瓶细胞，在不同培养液里分别培养48小时。应用实时荧光定量PCR检测HK一2 细胞里hURATlmRNA的相对表达量。 l 结果 1．尿酸盐晶体在pH值5．5．6．1的酸性条件下呈针状，有聚集现象：随 6．5．7．6时，晶体针状趋于变小，并分散于液体中； 着pH值的提高，在pH 在pH值8．O的碱性条件下晶体变为颗粒状，甚至溶解。 短针状或繁星状：健康对照23例，检测到尿酸盐晶体2例(8．7％)，呈繁星 状；两组检出率有统计学差异(PO．05)。 (P0．05)。 结论 1．当体液pH值呈弱酸并趋于碱性时，尿酸晶体变小；当pH值在7．O 左右时，既不破坏肾脏的生理环境，又有可能阻止高尿酸血症和痛风病人尿 酸盐肾脏沉积和肾结石的形成，并且促进尿酸排出。 2．尿液尿酸盐结晶的检测对痛风的诊断具有临床意义。尽管B超检查 未显示有肾结石，但尿中尿酸结晶呈阳性，提示存在尿酸肾结石形成和尿酸 对肾脏损伤的风险，同时可以指导合理选择降尿酸药物的应用，以免使用尿 酸促排药物不当而引起尿酸盐结石的形成。 3．果糖可上调hURATlmRNA的表达，可能与长期服用果糖饮料易患 高尿酸血症有关。 关键词痛风；尿酸；尿酸盐晶体；果糖；基因表达 2 Speciality： Medicine Directed by