瘦素、BDNF及其受体(Trk B)在人结直肠癌细胞中的表达及生物学意义.pdfVIP

√ IlIllll IllIIll,1111 1 fl IIl Y1901620 目 录 中文摘要………………………………………………………………………．1 英文摘要………………………………………………………………………．4 研究论文瘦素、BDNF及其受体(TrkB)在人结直肠癌细胞中的 表达与生物学意义 前言………………………………………………………………………8月IJ舌………………………………………………………………………8 材料与方法……………………………………………………………．．9 结果……………………………………………………………………．14 附图……………………………………………………………………16 附表……………………………………………………………………．17 讨论……………………………………………………………………．23 结论……………………………………………………………………．27 参考文献………………………………………………………………27 综述瘦素、BDNF(脑源性神经营养因子)与人结直肠癌关系 的研究进展…………………………………………………………．．31 致谢…………………………………………………………………．．j……．．42 个人简历……………………………………………………………………．．43 中文摘要 瘦素、BDNF及其受体(TrkB)在人结直肠癌 细胞中的表达与生物学意义 摘 要 目的：结直肠癌是一种“现代病”一与现代生活方式和饮食类型有关。 大量流行病学，特别是移民流行病学研究显示，结直肠癌的发病与能量摄 入过多、肥胖、体力活动减少有关。就病因学而言，起决定作用的因素是 环境因素而非遗传因素，结直肠癌是一个生活方式相关癌。在发展中国家， 人们越来越多的采用与癌相关的生活方式包括体力活动减少，饮食“西方 化导致的肥胖是结直肠癌发病率快速上升的重要原因。据预测，我国的 结直肠癌发病率和死亡率在今后很长一段时期内将稳步上升，成为最常 见、发病率上升最快的恶性肿瘤之一。脂肪组织分泌雌激素、胰岛素和胰 岛素样生长因子，还分泌不同的生物活性物质，称作脂肪因子，其中最引 性神经营养因子(Brain—derivedneurotrophic kinase B，Trk receptorB)是BDNF的特异性受体。 受体B(Tyrosine 瘦素的血清浓度与身体脂肪总量和总体重直接相关。我们的前期实验针对 瘦素、瘦素受体在结直肠癌组织和正常肠管组织中的表达情况进行了研 blot· 究，发现瘦素和瘦素受体与结直肠癌密切相关。本研究采用Western 的方法检测结肠癌细胞株DLD-I中瘦素和BDNF的表达，进一步分析瘦素 肠癌细胞增殖生长的关系，探讨可能影响结直肠癌发生、发展的因素，试 图为结直肠癌的诊断和治疗提供新的方法和理论依据。 方法： 1人结肠癌细胞株DLD一1和正常人肠上皮细胞株HIEC均由中山大学 肿瘤防治中心(华南肿瘤学国家重点实验室)赠送。将其置于含10％胎 牛血清的DMEM培养液，37。C，5％的CO：培养箱中培养。定期更换培养液， 显微镜动态观察细胞生长情况，及时传代培养。 2蛋白免疫印迹Westernblot的方法检测结肠癌细胞株DLD-1和正 中文摘要 常肠上皮细胞株HIEC中瘦素、BDNF和TrkB蛋白的表达情况。首先用细 胞裂解液裂解细胞，获取蛋白提取液，并用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定 总蛋白浓度。其次将蛋白提取液SDS—PAG