CRISPRCas9介导的基因组编辑技术宁静.pdf

年第 卷第 期 生 物 学 通 报 2016 51 4 1 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑技术* 宁 静 李明煜 鲁凤民** （北京大学基础医学院病原生物学系 北京 100191 ） 摘要 规律成簇间隔短回文重复序列(CRISPR)协同其相关蛋白 Cas 组成了细菌和古细菌 的获得性免疫系统 利用该系统可以对外来某一特定单链或双链 实施高度特异性沉默 。 DNA 或降解的特性 近年来对基因组进行精确定点编辑的 系统迅速发展 着重介绍了 ， CRISPR/Cas 。 系统的研究历史 结构 分类及作用机制 并分析讨论了现阶段以 为核心的 CRISPR/Cas 、 、 ， Cas9 Ⅱ型系统在应用方面存在的问题及前景。 关键词 基因编辑 CRISPR 系统 CRISPR/Cas9 中国图书分类号： 文献标识码： Q78 A 基因组定点编辑是一种重要的分子生物学技 些工具均可对基因组进行精确的定点编辑 其中 。 术 可以实现目的基因的敲除与定点敲入 或在转 与 所编 ， ， CRISPR CRISPR associated sequence （Cas ） 录水平上对目的基因的表达进行调控。 码的 Cas 蛋白组成的 CRISPR/Cas 系统是近年来 目前 基因组定点编辑的工具主要有锌指核酸 炙手可热的一种新型基因编辑方法 它具有操作 ， ， 酶 转录激活样效应因 简单 成本低 作用高效等众多优点［1 ］ （ ， ）、 、 、 。 zinc finger nucleases ZFNs 子核酸酶（transcription activator-like effector nucle- 1 CRISPR/Cas 的研究进程 归巢核酸内切酶 和 年 日本大阪大学研究人员首次发现 ， ）、 （ ） ， ， ases TALEN mega nucleases 1987 规律成簇间隔短回文重复序列（clustered regularly 大肠埃希菌碱性磷酸酶基因的编码区附近存在由 这 简单重复序列组成的特殊