缺氧状态下ERK12的激活及肝癌细胞Bel-7402细胞周期的关系.pdfVIP

中山大学硕士学位论文 缺氧通过ERKI／2的激活调节肝癌细胞Bel．7402的细胞周期 1-7402 缺氧状态下ERKl／2的激活与肝癌细胞Be 细胞周期的关系 专 业：外科学 硕士生：林武 指导教师：何强(教授) 中文摘要 目的：慢性缺氧是多数实体性肿瘤细胞的微环境改变特征之一，它可促使 细胞的基因及蛋白表达发生改变，增强肿瘤细胞的增殖、黏附、侵袭能力及对 化疗药物耐药性。ERKI／2是细胞在缺氧条件下激活的重要激酶之一，参与调节 新生血管形成、细胞的增殖侵袭功能。本实验主要了解缺氧／复氧对肝癌细胞株 Bel．7402的增殖侵袭功能、细胞周期及对化疗药物耐药性的影响，进一步探讨 ERKl／2在缺氧条件下影响肝癌细胞功能的作用。 方法：免疫印迹检测缺氧／复氧及加入抑制剂U0126对ERK1／2活化程度的 影响。MTT法检测缺氧／复氧细胞增殖活力的改变以及5．氟尿嘧啶在缺氧／复氧 条件下对细胞的抑制作用。流式细胞术检测缺氧／复氧条件下细胞周期及凋亡细 胞比例。 结果：①缺氧24小时后细胞增殖率为53．O％，48小时后为43．6％，72小 时后为40．4％，缺氧24小时后复氧24小时，细胞增殖率上升为83．9％，复氧 48小时后为106．9％，缺氧抑制细胞的增殖能力，复氧后增殖能力较前有所增强。 ②缺氧诱导细胞停留于GI期，随着缺氧时间延长，Gl期细胞比例逐渐增加 (69．4％VS79．3％VS lI．9％VS 82．3％)，而S期细胞比例逐渐减少(23．8％VS 9．4％)；(§)ERKl／2在缺氧l小时后、低于7％02浓度及含有胎牛血清条件下被 激活，给予不同浓度MEK抑制剂U0126后，ERKl／2的活性受到抑制，同时发 现Gl期细胞比例减少且与ERKI／2的抑制程度成正比；④缺氧明显增强细胞对 中山大学硕士学位论文 缺氧通过ERKI／2的激活调节肝癌细胞Bel-7402的细胞周期 氟尿嘧啶的耐药性，常氧条件下氟尿嘧啶的IC50为0．2041．tM／mL，而缺氧条件 有增加细胞对氟尿嘧啶的敏感性。 结论：缺氧依赖于血清中的某些物质激活ERKl／2，并参与促使细胞停留于 GI期，从而抑制细胞的增殖能力。缺氧通过减少S期细胞比例而增强细胞对氟 尿嘧啶的耐药性。 关键词：肝癌；缺氧／复氧；细胞外信号调节激酶1／2；5．氟尿嘧啶； n 中山大学硕士学位论文 缺氧通过ERKIl2的激活调节肝癌细胞Bel．7402的细胞周期 The RelationshbetweenActivationofERKl／2 ip andCell of CellBel--7402 CycleHepatocarcinoma under Condition Hypoxic Major： Surgery Name： LinWu Supervisor：He Qiang(Professor) ABSTRACT ofthecharacteristicsofmicroenvironment objective：Chronichypoxia,one inmostsolid ofcellularand changes