水稻种子病原菌monographellaalbescens之分离及生理研究.pdfVIP

高雄師大學報 2016, 41, 1-23 水稻種子病原菌 Monographella Albescens 之分離及生理研究 1 2 3 王惠亮 、黃啟傳 、柯立祥 摘 要 臺灣地處亞熱帶，屬於高溫多濕的海島型氣候，適合一些稻作病原菌之繁殖及 生長，因此導致每年因稻作病害引起的經濟損失達 6%左右。本研究自台東縣池上鄉 新興育苗場之高雄 139 號水稻種子，獲得一株代號為 Ma-1027 之分離菌株。並針對 此菌株進行觀察與研究。首先以光學顯微鏡觀察 Ma-1027 之孢子，得知其外觀呈現 透明橢圓之紡綞形，具有 1-2 隔膜，孢子大小約為 11-21×4-8μm2 。再以分子生物技 術鑑定，分別使用 18S-F/28S-R 和 A1-16S-23S-F/A1-16S-23S-R 引子對，進行 Ma-1027 genomic DNA 之聚合酶連鎖反應(Polymerase chain reaction ，PCR)增幅及水平電泳膠 體分析。結果顯示，Ma-1027 的 PCR 核酸產物之大小約為 650 bp 。將PCR 產物之核 苷酸序列進行譯讀與比較，結果顯示 Ma-1027 與 NCBI 中的Monographella albescens isolate CIAT 11(AJ132506.1)之 5.8S rRNA gene 、internal transcribed spacer 1 (ITS1) 及 internal transcribed spacer 2(ITS2)核苷酸序列相同度達 100％。將 Ma-1027 可以 接種至高雄 139 號水稻葉面，可以產生相同之病徵，顯示此分離培養菌株之穩定性。 在 Ma-1027 菌株之生理研究方面，培養條件為培養溫度 20℃ ，培養基添加果糖 (fructose)作為碳素源，硝酸鈉為氮素源，pH 6 ，對菌絲的生長條件最佳。以39 個水 稻品種進行感病性測試，結果顯示，全部皆對 Ma-1027 不具抗病性。最後以藥劑進 行室內篩選，結果顯示，以 25%撲克拉乳劑(Prochloraz)稀釋 1000 倍、34%殺紋滅達 樂溶液(Hymerxazol+Metalaxy)稀釋 1000 倍、40%亞賜圃乳劑(Isoprothiolane)稀釋 1000 倍及 10%菲克利乳劑(Hexaconazole)稀釋 1500 倍之處哩，對 Ma-1027 菌絲生長之抑 制性較強。 關鍵詞：聚合酶連鎖反應(PCR) 、水稻、病原菌 投稿日期：2016/09/30 ；接受日期：2016/12/13 1 國立高雄師範大學生物科技系教授兼副校長 2 國立屏東科技大學農園生產系研究生 3 國立屏東科技大學農園生產系教授 2 高雄師大學報 第四十一期 Studies of Isolation and Physiology of Monographella Albescens Pathogen from Rice Seeds * ** *** Hui-Liang Wang Chi-Chuan Huang Lih-Shang Ke Abstract Taiwan is located at tropical and sub