外源性褪黑素对豚鼠形觉剥夺性近视中褪黑素受体、iNOS、c-fos表达的作用.pdfVIP

摘要 外源性褪黑素对豚鼠形觉剥夺性近视中褪黑素受体、iNOS、 c-los表达的影响 研究生：尹靓瑶 导师：陈悦 郑州大学第一附属医院眼科 河南 郑州450052 摘要 近视是一种常见的屈光不正，并有引发病理性改变的风险。包括人在内的 大多数动物出生时是处于远视状态的，在生长过程中逐渐形成证视。这个过程 是需要依赖视觉的。如果此过程中缺乏早期的视觉经历，则很可能会导致眼球 的发育异常，最终导致近视的形成。形觉剥夺性近视(form deprivationmyopia， FDM)是指用人为的方法比如缝合眼睑、戴弥散镜片或半透明眼罩来改变实验动 物的视觉经历，造成实验动物屈光度及眼轴长度发生改变从而引起近视的一种 实验方法。Wiesel于1977年用缝合恒河猴眼睑的方法首次成功诱导出形觉剥夺 性近视，此后近视动物模型建立的方法在不断的发展与完善。已有的研究表明， 形觉剥夺性近视是一种涉及多种介质与因子改变的复杂的过程。新近的研究将 重点越来越聚焦于视网膜上各种神经介质的功能和变化，这些神经介质中，褪 黑素(melatonin．MLT)逐渐受到人们的关注。 褪黑素是一种神经内分泌激素，化学名为N．乙酰一5．甲氧色胺，由5一羟色胺 转化而来。因发现进入蛙黑色素细胞后会使蛙全身的肤色变浅而得名。在生理 状况下，人及其它哺乳动物、鸟类体内褪黑素主要来源于松果体。但有些松果 体外组织也能合成少量，例如视网膜、肠、副泪腺等。松果体内分泌褪黑素呈 24tJ,时规律性波动，表现为夜间分泌增加而白天分泌减少，其分泌节律由交叉 上核团(SCN)根据昼夜节律来控制。 褪黑素在动物体内发挥各种生理作用需要通过褪黑素受体的介导来完成。 二十世纪末召开了国际药理学联合会会议，在此次会议上MLT受体被分为3种 ! 摘要 亚型，分别为MTI、MT2、MT3；人眼部视网膜及其外大部分眼部组织中存在 MTI、M12。MLT不仅具有清除氢氧自由基的能力，而且可以抑制体内一氧化氮 (No)过度生成，对损伤和炎症有保护作用。c-los是一种原癌基因，属于即刻一 早期基因类。本实验在建立豚鼠形觉剥夺性近视模型的同时，给予不同剂量外 的变化，推测外源性MLT在FDM形成中的作用。 材料与方法 选用出生后7天的雄性健康花色豚鼠40只，复方托品酰胺眼液滴眼后检影 验光，排除先天性近视及其它眼疾。用半透明眼罩遮盖豚鼠右眼，左眼为对照 眼，建立FDM模型。将40只豚鼠随机分为4组，每组10只。A组为对照组， 经腹腔注射生理乩水5ml·k91，B、C、D组分别经腹腔注射外源性MLT5mg+kg～、 10mg·kg-1、20mg·kg一，隔R一次，连续注射8周。实验进行8周后，用A超测 量豚鼠双眼眼轴长度，用检影验光法检测双眼屈光度数，用免疫组织化学染色 Plus6．0图像分析软件 的表达水平。采集相应的视网膜切片图像，用Image．Pro 进行分析，用平均光密度值来表示以上指标的表达强度。 所有的实验数据用X±s表示，数据的统计学分析采用SPSS17．0统计软件 包，首先进行方差齐性检验，然后再行单因素方差分析及LSD．t检验，以a--0．05 作为检验水准。P0．05为差异有统计学意义。 结果 模型建立成功。 2．不同剂量MLT作用于FDM，随外源性MLT剂量的增加，与A组相比， 以上指标变化被明显抑制甚至逆转：C组和D组FDM眼的屈光度数、眼轴长度、 II ! 摘要 义；但B组与A组之问的差异无显著性(尸O．05)。 结论 1．8周后遮盖眼近视屈光度数增加，眼轴延长，成功建立FDM模型。 2