布鲁氏菌病检测技术.doc

布鲁氏菌病检测技术 布鲁氏菌病检测技术 1.概况??????? 布鲁氏菌病(简称布病)，是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患的传染病。临床主要特征是母畜流产、乳腺炎、不育和各种组织(如睾丸、关节)的炎症。人类感染布病后，病程长，反复发作，长期不愈。布病几乎遍及世界各地。凡有牲畜的地区都有布病流行。据不完全统计，在160个国家和地区中就有123个国家和地区有布病发生。我国多见于内蒙古、东北，西北等牧区。在北方农区也有散发，常呈地地方性流行。　　在不良环境，如抗生素的影响下，本菌易发生变异，通常变异形成的布鲁氏菌可在机体内长期存在。该菌对热抵抗力不强，63℃经7～10 min可被杀死，在鲜乳中可存活2天到18个月，在冻肉中可存活14～47天，在干燥土壤和胎儿体内可分别存活37天和6个月。对常用消毒药敏感，如0.1％升汞数分钟，1％来苏儿或2％福尔马林15 min可将其杀死。日光下曝晒4 h可杀死本菌。　　人和多种动物对布鲁氏菌易感。动物中羊、牛、猪的易感性最强。母畜比公畜，成年畜比幼年畜发病多。在母畜中，第一次妊娠母畜发病较多。带菌动物，尤其是病畜、流产胎儿、胎衣是主要传染源。消化道、呼吸道、生殖道是主要的感染途径，也可通过损伤的皮肤、粘膜等感染。常呈地方性流行。人主要通过皮肤、粘膜和呼吸道感染。??????? 本病一年四季均可发病。流行区在发病高峰季节(春末夏初)可呈点状暴发流行。患病与职业有密切关系，如：兽医、畜牧工作者、屠宰工人、皮毛工? 等感染机会较高。?????? 人类布鲁氏菌病的预防，首先要注意职业性感染，凡在动物养殖区、屠宰区、畜产品加工厂的工作者以及兽医、实验室工作人员等，必须严守防护制度(即穿着防护服装，做好消毒工作)，尤其在仔畜大批生产季节。更要特别注意。病畜乳肉食品必须灭菌后食用。必要时可用疫苗接种，接种前应行变态反应试验。阴性反应者才能接种。 2.实验室监测技术概述(据布鲁氏菌病防治技术规范)2.1检测方法 血清学实验或细菌分离。初筛试验选用虎红平板凝集试验(RBPT)或乳牛布病全乳环状试验(MRT)(见GB/T 18646)。正式试验选用动物布病试管凝集试验(SAT)或动物布病补体结合试验(CFT)(见GB/T 18646)2.2监测对象：牛、羊、猪、鹿等动物。 2.3监测方法：采用流行病学调查、血清学方法，结合细菌分离进行监测。 2.4监测范围、数量???????? 免疫地区：对新生畜、未免疫畜、免疫一年半或口服免疫一年以后的牲畜进行监测(猪可在口服免疫半年后进行)。监测至少每年进行一次，牧区县抽检500头(只)以上，农区和半农半牧区抽检200头(只)以上，交通不便的边远地区抽检3个乡9个村50%的牲畜进行血清学监测。???????? 非免疫地区：监测至少每年进行一次。达到控制标准的牧区县抽检1000头(只)以上，农区和半农半牧区抽检500头(只)以上；达到稳定控制标准的牧区县抽检500头(只)以上，农区和半农半牧区抽检200头(只)以上。???????? 所有的奶牛、奶山羊和种畜每年必须进行两次血清学监测。 2.5监测时间??????? 对成年动物监测时，猪、羊在5月龄以上，牛在8月龄以上，怀孕动物则在第1胎产后半个月至1个月间进行；对S2、M5、S19菌苗免疫接种过的动物，在接种后18个月(猪接种后6个月)进行。2.6监测结果的判定与报告??????? 初筛试验出现阳性反应，并有流行病学史和临床症状或分离出布鲁氏菌，判为病畜。??????? 血清学正式试验中试管凝集试验阳性或补体结合试验阳性，判为阳性畜。 ??????? 判定时应注意排除其它疑似疾病和菌苗接种引起的血清学反应。??????? 按要求使用和填写监测结果报告，并及时上报。??????? 疫情处理必须严格执行《牛结核病防治技术规范》的有关要求。 3.实验室检测方法? ??????? 实验室检测包括以下几种方法：3.1细菌学检测??????? 将样品剪成小块，用镊子夹住直接涂抹在肝汤琼脂平板上，一式两份，一份放10%二氧化碳中培养，一份在普通环境中培养，一般37℃培养10天，布氏杆菌菌落在上述琼脂板上呈无色、透明、圆形、隆起、表面光滑、均质样的菌落、菌落中央有时有很小的颗粒，菌落开始微透明，以后逐渐变为混浊，菌落大小不等。挑取菌落涂片镜检即可发现布氏杆菌。??????? 用母畜流产的胎儿组织和胎衣涂片镜检也能检测到布氏杆菌。3.2凝集反应试验? 3.2.1方法?????? 目前对于布病的诊断多采用凝集反应试验，主要检测血清或乳中的抗布鲁氏菌抗体。常用的监测方法有虎红平板凝集试验、布病试管凝集试验、全乳环状试验、补体结合试验。虎红平板凝集试验和全乳环状试验适用于家畜布病田间筛选试