杨梅黄酮对MPP+损伤的MES23.5细胞的保护作用和可能机制研究.pdfVIP

摘 要 帕金森病(Parkinsontsdisease，PD)是老年人常见的一种神经系统退行性疾病， 其最主要的病理学特征为黑质致密带(substantia nigrapar 因和发病机制尚不清楚，可能与遗传因素、环境因素、氧化应激、炎症反应、黑质 (substantia nigra,SN)铁聚积和细胞凋亡等多种因素有关。目前，临床上尚无成熟 有效的药物或方法来阻止或逆转PD的病情发展，因此寻找天然、高效、低毒的抗 PD药物成为了新的研究热点。 杨梅黄酮(myricetin)是一种天然的黄酮类物质。已有实验证明杨梅黄酮具有 抗炎、抗氧化、清除自由基等多种生物活性。为了探讨杨梅黄酮对PD是否具有防 治作用及其可能的作用，本实验应用经典的神经毒性药物1．甲基．4．苯基吡啶阳离子 (1-methyl-4．phenylpyridinium 胞置备PD细胞模型，采用甲基噻唑基四唑(methylthiazolyl Hochest染色、流式细胞仪分析技术(flow Blots技术， cytometry,FCM)、Western 并探讨了其保护作用的可能机制。实验结果如下： 1．MPP+(200 h后，细胞存活率明显降低，与正常 rtrnol／L)处理MES23．5细胞24 处理后，可明显减轻MPP+对细胞的损伤(PO．05)。 2．MPP+(200 h后，细胞出现明显的凋亡形态学改 pmol／L)处理MES23．5细胞24 变，如细胞核固缩、核碎裂等，与正常对照组相比差别具有高度统计学意义 3．MPP+(200 h后，细胞线粒体跨膜电位差 mnol／L)处理MES23．5细胞24 (mitochondrialtransmembrane potential，△甲m)明显降低，与正常对照组相比差 mol／L的杨梅黄酮共处理后，上述变化明 别具有统计学意义(P0．05)。加10’9 显减轻(PO．05)。 4．MPP+(200 species，ROS)生成显著增加，与正常对照组相比差别具有高度统计学意义 {＼叭Y帆2Ⅲ0叭4m吣2叭8Ⅲ4l＼114嗵 l 5．MPP+(200 lxmol／L)处理MES23．5细胞24 的杨梅黄酮共处理可显著抑制Caspase-3活性的增加(PO．05)。 6．MPP+(200 h后，Bcl．2mRNA表达水平明显降 Itmol／L)处理MES23．5细胞24 低，Bax 基因表达的影响(PO．05)。 7．MPP+(200 I上mol／L)处理MES23．5细胞5 以上结果表明，MPP+处理MES23．5细胞后，细胞存活率降低，细胞核出现固 分逆转上述变化。这提示杨梅黄酮能够拮抗Mpp+对细胞的毒性作用，其保护作用的 机制与其抗氧化及抗凋亡机制相关。本实验研究了杨梅黄酮对DA能神经元的保护 作用以及对其可能机制的初步探讨，为探索PD的预防与治疗的新方案提供新的实 验依据。 硕士研究生 张凯 指导教师 谢安木教授 MES23．5细胞 关键词：帕金森病；Myricetin；MPP