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黄酮类化合物及提取工艺与分析方法(郭彭靖)
黄酮类化合物的提取工艺与分析方法
作者,单位
中英文摘要,关键词
黄酮类化合物(flavonoids),又称生物类黄酮(bioflavonoids),是指具有色酮环与苯环为基本结构的一类化合物的总称,是多酚类化合物中最大的一个亚类。其基本骨架具有C6-C3-C6的特点,即由2个芳香环A和B,通过中央三碳链相互连结而成的一系列化合物。根据间三碳链的氧化程度、B环(苯基)连接位置(2-或3-位)以及三碳链是否呈环状等特点,黄酮类化合物分为许多不同类型,如黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、二氢异黄酮、查尔酮等(叶文峰,2000)。自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇,在银杏叶、山楂、杜仲、山香圆叶、水芹、竹叶、黄芪、丹参等植物中均有检出。到目前为止,已经发现有5000多种植物中含有黄酮类和异黄酮类化合物(蔡健等,2003)。天然来源的生物黄酮分子量小,能被人体迅速吸收,通过血脑屏障,进入脂肪组织,具有调节血脂、消除氧自由基、抗氧化、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、抗过敏、抗菌、抗病毒等生理功能(李楠等,2005)。许多应用研究表明,黄酮类化合物具有预防心血管疾病、防癌抗癌、防止骨质疏松和改善动物生长及降血脂、止血、抑制血小板聚集等多种药理作用。例如芦丁、槲皮素等能够增强心脏收缩;杜鹃素具有止咳祛痰作用;黄芩苷具有抗菌消炎、抑制肿瘤细胞作用;水飞蓟素具有保肝作用等(肖常厚,1997)。此外,黄酮类化合物也是重要的功能食品添加剂、天然抗氧化剂、天然色素、天然甜味剂(王晶等,2006)。
黄酮类化合物在人体不能直接合成,只能从食品中获得。主要是作为食品添加剂或直接应用于食品中增加其保健作用。例如茶多酚在功能食品中的应用主要是以茶叶及其提取物的形式添加到食品中。茶多酚具有抗疲劳、抗辐射、抗衰老等功能特性,茶叶具有独特的色、香、味、形,能使食品增香、调味、着色,因此茶多酚以茶叶的形式在食品中的应用十分广泛。近年来科学家都积极关注从植物体中提取纯度高、活性强的天然黄酮成分,并进一步将其加工成有特异功能的保健食品和药品等产品。
正是黄酮类化合物上述生物活性和药理作用引起了人们的广泛重视,对该类化合物的研究已成为国内外医药界研究的热门课题。黄酮类物质已成为一类具有广泛开发前景的天然药物(李莉等,2006)。
1.黄酮类化合物的主要提取工艺
1.1有机溶剂萃取法
利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同,选用不同的溶剂萃取可达到精制纯化目的。唐津忠等(2003)采用正交实验法确定了金莲花中总黄酮提取的最佳方案,通过对提取溶剂、提取固液比、提取时间和提取温度四因素三水平的正交实验,得出最佳提取条件。周才琼(2003)采用由低极性到高极性的系统溶剂提取法浸提金银花花叶,通过纸斑反应,紫外灯观察颜色并用荧光检测,试验表明,金银花及叶中的黄酮类种类相似,但叶中黄酮类含量大大高于花中的含量,金银花叶中的黄酮类化合物最佳提取工艺为:90%乙醇、物料比1:12、70℃温度下浸提60 min。
1.2超声提取法
超声提取法是利用超声波产生的强烈振动、空化、粉碎等作用,将植物药材中的成分提取到溶剂之中。超声波是一种强的弹性波,其振动能产生强大的能量,给媒质质点以很大的速度和加速度,从而快速穿透植物体,使溶剂能和植物中的有效成分充分接触,因此有利于有效成分向提取溶剂转移,提高提取效率。近年来超声提取在中药研究中有较多应用。超声的空化作用对细胞膜的破坏有助于黄酮类化合物的释放与溶出。裴凌鹏等(2003)采用超声波方法从葛根中提取总黄酮,用正交法确定了超声波方法提取总黄酮的最佳工艺条件为:乙醇浓度70%、超声波提取25 min、提取次数3次、温度25℃。
1.3 碱性水提法
黄酮苷类有一定极性,溶于水,易溶于碱性水,难溶于酸性水,故可用碱性水进行提取,再将碱性提取液调成酸性,黄酮苷类即可沉淀析出。王永宁等(2003)采用了碱性水提取和乙醇提取两种不同的方法,对槐花中的黄酮类化合物进行提取研究后发现,碱性水提取法的提取率比乙醇提取法的提取率高。
1.4 微波法
微波法利用磁控管所产生的每秒24.5亿次超高频率的快速震动,使内分子间相互碰撞、挤压利于有效成分的浸出,具有反应高效性和强选择性等特点。龚盛昭等(2003)以石灰水为介质,进行了微波场协同提取芦丁的研究,得到了微波场协同提取芦丁的最佳工艺条件为:m(水)/m(槐米)=16、时间 10 min、微波功率 296 W、提取 2 次。微波协同提取芦丁比传统水提法有提取时间短、产率高等优点。
1.5 超临界萃取法
超临界CO2萃取技术以液态CO2为溶剂进行提取,提取率与提取温度、提取压力、CO2消耗量等因素有关。陈从贵等(2002)研究探讨超临界CO2提取分离银杏叶药用成分的适用性和可操作性,提出溶剂浸提与超临界流体萃取相结合的生产工
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