浙江省汉族人群耳聋相关基因的突变探究.pdf

里塑垦兰堕望主兰堡垒苎 浙江省汉族人群耳聋相关基因的突变研究 一一 中文摘要 耳聋是导致言语交流障碍的常见疾病，严重影响人们的身心健康和生活质 量。每1000名新生儿中就有1．3例听力障碍患儿，且迟发性听力损失的发病率 loss，NSHI)，即除了听力障碍外，没有其它临床疾病特征。耳聋是由 hearing 遗传因素和环境因素共同作用引起的。其中，约50％的患者是由遗传缺陷造成 的，遗传方式表现为常染色体隐性遗传、常染色体显性遗传、X．连锁遗传、Y- 连锁遗传及母系遗传等。随着人们生活水平和健康意识的提高，造成耳聋的各 种环境因素逐步得到控制，而遗传因素导致的耳聋逐渐占主导地位。因此，开 展遗传性耳聋相关分子致病机制的研究对聋病的早期诊断、预防和治疗具有重 大的指导意义。 导致母系遗传性耳聋的线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)突变主 要位于12S 但目前，关于中国NSHl人群tRNAs。‘(uCN’基因突变情况及相关功能研究报道较 少。另有研究表明大约50％的常染色体隐性遗传的NSHI是由GJB2基因突变 缝隙连接通道在耳蜗内钾离子循环和细胞间通讯中起重要作用。GJB2基因上耳 聋相关的突变热点和突变频率在不同地区和种族间存在显著差异，且不同的 GJB2突变导致的耳聋临床表型，如双耳对称性、发病年龄、听力损失程度及听 力曲线等方面也存在明显的差异。 因此，本研究将以线粒体tRNA“ucN)矛n GJB2基因为切入点，通过建立的 浙江省汉族聋病资源库，绘制中国汉族人群NSHI相关基因的突变频谱，了解 中国汉族NSHI患者耳聋相关基因的常见致病突变方式，并发现热点突变和新 突变，探讨这些耳聋相关基因突变的分子致病机制。在此基础上，进一步开展 患者基因型和临床表型的相关性研究，为临床上聋病诊疗标准的合理制定和有 效实施提供科学的理论依据和技术指导。本研究主要包括以下三部分内容： 第一部分非综合征型耳聋病例收集、遗传资源保存及临床资料评估 此部分研究旨在建立覆盖浙江省全省的聋病资源库，目前已收集NSHI患 者2337例。该资源库包含以下具体内容：l、知情同意书档案；2、受试者及其 家属基本资料(调查表等)；3、受试者及其家属听力学资料、体格检查结果等； ————————————————————————一一。一塑型垦堂堕堕主兰垡垒奎 4、受试者及其家属外周静脉血样本；5、受试者及家属的全基因组DNA样本； ．一一 6、受试者及其家属基因检测结果报告单；7、部分重点家系的永生细胞株。利 用建立的聋病资源库，对现有耳聋家系的地区分布、遗传方式、听力学特点以 及常见的耳聋基因突变进行初步地分析。这些工作的完成不仅可以永久地保存 宝贵的聋病资源，为今后科研及临床工作的进一步开展奠定了良好的基础。同 时，也为聋病患者及其家属提供遗传咨询、婚配指导和听力补偿办法的相关建 议，实现耳聋的早期诊断、干预和治疗，最终有效降低耳聋的发病率。 第二部分线粒体tRNAs盯(UCN)基因突变与耳聋相关性的研究 此部分研究以浙江省汉族904例NSHI患者为研究对象，探讨线粒体 tRNASer(UCN)基因突变与耳聋的相关性。结合前期工作绘制了浙江省汉族聋病人 7445AC、7471del 点。另外，本研究还首次报道了tRNA8。“uCN)7444 GA突变和GJB2 235delC纯 合突变协同致病。 在此基础上，我们对3个携带tRNA踮‘(uCN’基因新突变的汉族耳聋家系进行 了详细的临床、分子遗传学及细胞生化等特征的评估，进一步探讨tRNAr(UCN’ 基因新突变在耳聋发病过程中的作用。临床资料表明，1个携带7505TC突变 家系(YJ060)和2个携带747