豚鼠胆囊胆固醇结石形成过程中小肠动力变化的探究.pdf

·中文论著摘要· 豚鼠胆囊胆固醇结石形成过程中小肠 动力变化的研究 目 的 随着人们生活水平的提高，胆囊胆固醇结石的患者越来越多见，因而，胆囊 胆固醇结石的形成机制逐渐成为国内外胆道疾病的研究热点。过去的研究多集中 在脂质代谢异常、胆囊吸收与分泌功能障碍、胆囊收缩功能的改变等n训。近年来， 肠道运动功能的改变在结石形成过程中的作用逐渐受到重视，已有的研究显示， 肠道运动功能与胆囊排空有密切的关系，胆囊排空主要发生在进食后和消化间期。 前者主要受十二指肠壁释放的胆囊收缩素的影响。消化问期的胆囊收缩与肠道移 motor 行运动复合波(migratingcomplex，删C)有密切关系。在健康人，胆囊排 空总是发生在消化间期删CII相的前半部分，并于MMCIII相前达到最大收缩，有很 好的对应关系。而胆固醇结石患者体内小肠删C多出现频率下降，周期时间延长的 现象，胆囊运动也较健康人减弱，这些会导致胆汁淤积，促进结石形成。对于高 胆固醇饮食引起肠道运动功能减退的机制，目前尚不清楚，有人认为，过多的胆 固醇整合到肠道平滑肌细胞膜上，改变了膜的流动性及膜受体的功能，影响肠道 的收缩和舒张功能。由于肠道慢波电活动与其自身运动有直接的联系，而cajal cellsof 间质细胞(interstitial cajal，ICCs)是胃肠道慢波的起搏细胞，本 课题拟从此为切入点，观察成石过程中小肠电活动与肌张力的变化，为胆固醇结 石成因的研究开拓新的思路。 实验方法 一、实验对象 实验组(CG)50只，适应性喂养一周后，分别给予普通颗粒饲料和致石饲料，致 石周期为6周，饲养期满后观察各项指标。 二、标本采集． 饲养期满后麻醉动物，迅速剖腹采集豚鼠小肠，胆囊，胆汁，胆结石等标本。 三、实验方法和检测指标 1、致石率评定和红外光谱结石定性：解剖显露豚鼠胆囊，肉眼即可辨别胆 囊结石形成情况，统计结石形成率。采用红外光谱溴化钾压片法，对结石成分进 行定性分析。 2、胆囊胆汁涂片后于偏振光显微镜下观察。 3、小肠cajal样问质细胞电镜观察。 4、制备豚鼠离体小肠肌条，RM一6240HJ型多道生理信号采集处理系统记录 小肠肌条慢波电活动情况，比较对照组与实验组小肠肌条慢波频率和振幅的变化。 5、RM-6240 HJ型多道生理信号采集处理系统记录小肠肌条收缩的频率及张 力效应值，比较对照组与实验组小肠肌条收缩的变化。 实验结果 一、豚鼠胆囊胆固醇结石模型构建情况 高于对照组。收集结石，经冲洗、风干，溴化钾压片后制成薄片，红外光谱仪分 析其成分证实为胆固醇结石。 针刺胆囊抽取胆汁涂片，并于偏振光显微镜下观察，对照组胆囊胆汁未见胆 固醇结晶，实验组胆囊胆汁见典型胆固醇结晶。 ntersti ti aI I-Ii ke I样间质细胞(i 二、豚鼠小肠Caja caja ce|ls，lCLCs)电镜观察 Cajal样间质细胞在电镜下呈长的，高电子密度的肌样细胞，胞质少，染色 质分散，基底膜不完整，并且与肠道平滑肌细胞和神经纤维束有密切联系。 三、豚鼠小肠离体肌条慢波电活动和肌张力的测定结果 对照组豚鼠小肠离体肌条慢波频率为17．45±1．50次／min，慢波振幅为 2 31．34％。实验组数据较对照组明显降低，P值分别为：4．56X10～，4．00×10。13， 均O．05；组问比较t值分别为：一27．083，一13．236。 对照组豚鼠小肠离体肌条肌肉收缩频率为15．85±1．76次／min，张力效应值 为：1．20+_0．1 lg，变异系数分别为：11．08％，8．97％；实验组豚鼠小肠离体肌条 21．0196，2．