重度子痫前期患者外周血NK细胞表面受体NKG2A、NKG2D表达探究.pdfVIP

·中文论著摘要· 重度子痫前期患者外周血NK细胞表面受体 NKG2A、NKG2D表达研究 目 的 产妇和围产儿死亡的主要原因之一。本病以妊娠20周后出现的高血压、蛋白尿、 水肿为特征，并伴有全身多脏器的损害，严重者可出现抽搐、昏迷、脑出血、心 力衰竭、胎盘早剥、DIC、甚至死亡。由于其发病机制至今尚不明确，严重影响了 有效防治。近几年来由于分子免疫学的飞速发展，子痫前期被认为与炎症、血管 内皮功能障碍、母胎间的免疫不耐受密切相关，从而引起免疫损伤、滋养细胞缺 血及胎盘植入异常，引起全身不同程度的血管内皮损伤和严重的全身性炎症反应， 弥漫性血管内皮细胞损伤被认为是子痫前期发病的中心环节。 NK细胞在人外周血中占淋巴细胞的5％-15％，是机体重要的免疫细胞。NK细胞 不同于T、B淋巴细胞，它不表达抗原特异性受体，其功能的发挥主要依赖于NK细胞 能够表达多种能与MHC或非舢C配体结合的受体，传递抑制或激活信号，调节NK 细胞的活性。NK细胞含有刺激性和抑制性两种受体，抑制性受体又可分为两类， 即免疫球蛋白超家族和C型凝集素样受体，其中前者包括Ly49、CD94／NKG2和 NKG2D，后者包括杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)和白细胞免疫球蛋白样受体 (LIR)． 自然杀伤细胞(NK细胞)作为正常妊娠母胎界面免疫调控的主导细胞，能调节 滋养细胞浸润，协助滋养细胞重塑子宫螺旋动脉，在妊娠期间机体免疫平衡状态的 维持中发挥极其重要的作用。故而深入研究NK细胞将是对妊高征发病机制研究的 一个切入点。而NK细胞的活性受其表面受体的调节，因此NK细胞表面受体的变化 将使其活性升高或降低，从而致母胎免疫失衡，这可能是子痫前期疾病发生的一个 重要原因。 本试验应用流式细胞分析技术，检测重度子痫前期妇女外周血NK细胞表面抑 制受体NKG2A和活化受体NKG2D的表达，与同期正常妊娠妇女进行对照，初步探 讨NK细胞表面抑制受体NKG2A和活化受体NKG2D在重度子痫前期发病中的变化， 以期探讨子痫前期的发病机制，从而为寻找防治措施提供新的思路。 方法 一、研究对象 选取2010年11月至2011年3月在盛京医院产科住院的孕妇为研究对象。实 前期的诊断依据乐杰主编第七版《妇产科学》教材的诊断及分类标准。对照组为 正常妊娠妇女15例，年龄27．3士1．5岁，孕周为36．4+1．3周。以上两组妊娠组均为 初产妇、单胎妊娠，年龄、孕周无统计学差异，既往无高血压、糖尿病、免疫系统 疾病及其特殊疾病史，无妊娠合并症，未服用免疫抑制或增强药物。 二、标本采集及单个核细胞分离 各组妇女空腹采取肘静脉血2ml，加入EDTA抗凝剂中。将新鲜标本采用淋巴 细胞分离液提取出单个核细胞，提取出的单个核细胞用lmlPBS稀释，备用。 三、流式法检测NKG2A和NKG2D 每份标本设两个试管，实验管及阴性对照管。实验管中依次加入抗体 10u 5Il CD3一PerCP、CD56-FITC各20p1、NKG2A-APC1，NKG2D-PE1，对照管 1及PBSl5u 中加入抗体CD3一PerCP、CD56-FITC各20|Jl，然后向每管中加入提 取的单个核细胞悬液50|l 1。加样完毕后，震荡混匀，避光静置30分钟。各试管 la 中依次加入400 1PBS，吹打重悬，上机检测。 勿} 甲 当日习弋 高于J下常妊娠组99．02％±1．94％，但差异无统计学意义(PO．05) 2 结论 重度痫前期患者外周血NK细胞表面抑制受体NKG2A表达较J下常妊娠妇女降 低，而激活受体NKG2D表达有增高趋势，提示子痫前期患者免疫平衡失调，NK细 胞可能参与子痫前期病理生理过程。 。