谷氨酸论文.docVIP

概述： 1、谷氨酸的历史 1866年德国 H.ittthausen用硫酸水解小麦面粉，分离到一种酸性氨基酸，依据原料的取材将它命名为谷氨酸。1872年Hasiwitz和Habermaan用酪蛋白水解也制得谷氨酸。1908年日本池田菊苗在探讨海带汁鲜味时，提取了谷氨酸，开始制造“味之素”。1901年日本味之素公司用水解面筋法生产谷氨酸。1936年美国从甜菜废液（斯蒂芬废液）中提取谷氨酸。1954年多田、中山两人报告了采用微生物直接发酵谷氨酸的研究。 直到1956年日本协和发酵公司的木下祝郎分离选育出一种新的细菌——谷氨酸棒状杆菌，能同化利用100g葡萄糖，可直接发酵并积累40g以上的谷氨酸。随后进行了工业化研究，自1957年起发酵法制取味精，正式商业化生产。20世纪60年代后，世界各国也兴起发酵法生产味精，以甘蔗或甜菜、糖蜜、淀粉、醋酸、乙醇为原料，由于石油价格上涨和石油制品的安全性，相继改用糖蜜、淀粉原料为主的发酵法生产味精。 2、谷氨酸的发展空间: 二、谷氨酸发酵的微生物： 1、谷氨酸发酵菌种及特征： 现在经过 鉴定和命名的谷氨酸产生菌很多，分属于棒状杆菌、短杆菌属、微杆菌属和节杆菌属中的细菌。它们在形态及生理方面仍有许多共同的特征，如:①细胞形态为球状、棒状或短杆状；革兰氏染色阳性，无芽孢，无鞭毛，不能运动；发酵中菌体发生明显的形态变化，同时发生细胞膜渗透性的变化。②都是需氧型微生物；脲酶强阳性和生物素缺陷性；二氧化碳固定反应酶系活力强，柠檬酸合成酶、乌头酸梅、异柠檬酸脱氢酶和谷氨酸脱氢酶活力强；异柠檬酸裂解酶活力欠缺或微弱，乙醛酸循环弱，a-酮戊二酸氧化能力缺失或弱，还原型辅酶Ⅱ进入呼吸链能力弱。③不分解淀粉、纤维素、油脂、酪蛋白以及明胶，能利用醋酸，不能利用石蜡。④具有向环境中泄露谷氨酸的能力；不分解利用谷氨酸，并能耐高浓度的谷氨酸，国内谷氨酸生产菌： 我国的谷氨酸发酵已有40多年的历史。目前国内各味精厂所使用的谷氨酸生产菌主要有：①天津短杆菌(T613-)及其突变株TG-961、FM8209、FM-415、CMTC6282、TG-866、S9114、D85等菌株；②钝齿棒杆菌AS1.542及其突变株B9、B9-17-36、F-263等菌株；③北京棒杆菌（AS1.299）及其突变株7338、D110、WTH-1等菌株。现在多数厂家生产上常用的菌株是：T613、TG-961、FM-415、S9114、CMTC6282等。 2、谷氨酸生产菌在发酵过程中的形态变化 人们发现，谷氨酸生产菌在发酵过程中会发生明显的菌体形态变化。实践证明，在发酵过程中发现菌体形态有明显的变化时，正事产谷氨酸的激增时间。但在培养基含有过剩生物素的培养条件下，菌体形态则没有明显变化，却呈现耗糖、长菌、不产谷氨酸的异常发酵。为了阐明菌体形态变化与谷氨酸积累的关系，先从形态学的角度入手，结合谷氨酸发酵机制的理论作如下讨论: 2、1种子的菌体形态 将斜面合一、二级种子培养的菌体，用结晶紫染色，经显微镜观察，发现B9菌体在斜面和一、二级种子培养的不同培养条件下，细胞形态基本相似。斜面培养的菌体较细小，一、二级种子比斜面菌体大而粗壮，革兰氏染色深。菌体细胞多为短杆至棒杆状，有的微呈弯曲状两端钝圆，无分支；细胞排列呈单个、成对及“V”字形，也有栅状或有不规则聚块；分裂的细胞大小为（0.7~0.9）um×(1.0~3.4)um。由于斜面和一、二级种子的培养基营养丰富，生物素充足，从而保证菌体细胞的脂肪酸及磷酸的合成，形成正常的细菌细胞膜，因此，繁殖的菌体细胞均为谷氨酸非积累型细胞。 2、2谷氨酸发酵的不同阶段的菌体形态 众所周知，生物素是控制L-谷氨酸积累量高低的重要因素。生物素作为催化脂肪酸生物合成限速反应的关键酶——乙酰CoA羧化酶的辅酶，参与脂肪酸的合成，从而影响磷脂合成及细胞膜的形成。因此，为了形成有利于谷氨酸向外渗透的细胞膜，须使磷脂合成不充分，因而必须要控制生物素亚适量。在限量生物素的培养条件下，谷氨酸发酵是菌体先行繁殖，生物素由“丰富向贫乏”过渡。在发酵7~10小时候，生物素处于贫乏状态，长菌型细胞开始向产酸型细胞转变，通过再度分裂增殖，形成有利于谷氨酸向外渗透的磷脂合成不足的细胞膜，细胞出现伸长、膨大等异常形态，随之开始产酸。此后，异常形态细胞逐渐增多，产酸速度加快。到发酵16~20h时，生物素基本消耗完，完成了谷氨酸非积累型细胞向谷氨酸积累性细胞的转变。由于出去了渗透的障碍物，B9菌完全转变成异常形态的产酸型细胞，表现为OD值稳定，谷氨酸产量直线上升。直至发酵结束。 从谷氨酸发酵中菌体形态的变化来看，大致可以分为长菌型细胞、转移期细胞和产酸型细胞3种不同时期的细胞。 （1）发酵0~8h或0~10h,为长菌型细胞 细胞形态与二级种子基