第四章酶的分离与纯化第一次课改2.pptVIP

第四章 酶的分离与纯化 酶分离纯化的重要性 理论研究的需要 不知道编码基因的酶(蛋白) 测序,设计探针,钓基因 知道编码基因的酶 酶的结构分析,X-ray 酶的功能分析,动力学特性的研究 相互作用分析,其他蛋白和核酸 调控分析,调节亚基?磷酸化? 应用的需要 提高酶活 保持酶活 医药应用 酶分离纯化之前要考虑的问题 待纯化的酶的来源 Traditional natural sources Micro-organism, animal and plant tissue Cloning recombinant proteins into overexpression vector/host systems for intracellular production (E. coli the most used) In vitro protein synthesis Transcription/translation systems 对目的酶分离复杂性的充分认识 Object: to separate a particular protein from all other proteins and cell components 酶分离纯化可以利用的蛋白质的性质 大小 形状 溶解度 密度 电荷 多少 分布 特殊相互作用 疏水相互作用 亲和 Protein P