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伯劳特-培训资料HP的
幽门螺杆菌免疫印迹试剂盒;幽门螺杆菌免疫印迹试剂盒;医疗器械注册证;医疗器械产品生产制造认可表;生物制品检定报告书; 前 言;幽门螺杆菌的发现;在临床上HP可分为两种类型:
Ⅰ型,为产细胞毒素HP菌株,其检出率约占总HP的50%~60%,应用免疫印迹技术,显示其免疫活性蛋白区带有128、116、110、95、91、66、60、54、50、33和30KD等。其中细胞毒(Cag A)蛋白与128、116和110KD区带有关,空泡毒素(Vac A)蛋白与95和91KD区带有关,尿素酶蛋白与66、60、33和30KD区带有关,鞭毛蛋白与54和50KD区带有关。这类菌株能使胃上皮细胞出现空泡、变形和损害,易引起溃疡和诱发癌变。
Ⅱ型,是不产生细胞毒素的HP,即Cag A(-)和Vac A(-)株,这一类HP菌株毒性较小,感染后一般只是引起慢性浅表性胃炎而无临床症状。
世界上超过半数的人感染HP,但并不是所有的HP都产生空泡毒素,只有50%—60%具有空泡毒素活性的HP才是产毒菌株。因此对指导HP感染的治疗具有重要的意义。
; HP与慢性胃炎的关系; HP的致病作用 ;
胃癌与萎缩性胃炎和肠上皮化生有密切关系,这种病理学变
化一直认为是癌前病变。
Eurogast研究小组认为,100%伴有HP感染的人群中胃癌的危
险性比无HP感染的人群增加近6倍。
1994年,世界卫生组织(WHO)已将HP列为第一类生物致癌因
子。 ; 临床常用HP检测方法比较 ;免疫印迹简介
印迹技术是本世纪分子生物学领域三大发现之一。它与内切酶的发现和PCR基因扩增技术,给人类生物工程带来了革命性进展。它的基本原理是将凝胶电泳与固相免疫结合起来,主要有三个工序:
将蛋白质经凝胶电泳按分子量大小不同依次分离;
将分离的组分转印到印迹膜上;
对转印到印迹膜的蛋白成分进行免疫学检测。 ;HP抗体免疫印迹检测之基本原理
本试验是将标准的HP产毒株【CagA(+)和VacA(+)】的各种抗原成分提取出来,用聚丙烯酰胺凝胶电泳按分子量大小不同依次分开,再将其转印至印迹膜上,如果被检者血清有相应抗体,应用酶联免疫反应,就会在抗原的相应位置出现显色区带,据此可判断出被检血清中各种HP抗体。根据抗体的不同可推断HP类型,根据显色带的强弱、???长可观察治疗效果,预测溃疡有无复发的可能性。 ;各种胃、十二指肠疾病:包括胃、十二指肠溃疡、慢性胃炎、胃癌和胃淋巴瘤等;
非溃疡性消化不良;
缺铁性贫血口服铁剂治疗效果不佳者;
儿童消化不良或不明原因的生长发育迟缓者。;本检查无任何禁忌症,不需要空腹可随进采血检测。;本检查安全可靠,无任何副作用,尤其适用于儿童、孕妇HP感染的检测。; HP抗体免疫印迹试剂盒特点 ; 试剂盒组成(按40人份计); 幽门螺杆菌试剂盒的操作步骤 ;1 在量杯中将浓缩洗涤液用蒸馏水按 1:10 的比例稀释成洗涤应用液。
2 每槽加入洗涤应用液1ml, 再加入待测血清或全血10ul, 放在摇床上摇动30分钟。(或摇动混匀1分钟后,置37℃温箱中孵育30分钟)
3 取出反应槽,弃去槽中液体,并在平铺的纸巾上将其倒置经磕以拍干剩余液体,每槽加入洗涤液1ml,摇动洗涤1分钟,弃去槽中液体,并在平铺的纸巾上将其倒置经磕以拍干剩余液体,重复洗涤3—4次;; 4 每槽加入洗涤应用液500ul,再加入酶联试剂10ul,放在摇床上摇动30分钟。(或摇动混匀1分钟后,置37℃温箱中孵育30分钟)
5 同( 3 )洗涤。
6 加入显色剂 A 和 B 各0.5ml, 5—10分钟观察结果。
7 待阳性带显色清晰,即加终止液0.5ml,2分钟后弃去液体,用自来水冲洗后取出印迹膜,等干后对比《标准带》判断结果。; HP免疫印迹结果判断;HP免疫印迹实物图
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