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动物细胞培养技术;细胞 －生命的基本单位;功能单位;细胞的结构和功能;动植物细胞显微结构;;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; 最小的如人体的淋巴细胞, 仅6 μm ；血小板仅4 μm , ;细胞的基本共性;1925年：E.B.Wilson: “每个生物科学问题的关键必须在细胞中寻找” 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科;研究总体趋势;细胞培养技术;组织学与胚胎学 细胞生物学：形态、生理、遗传 肿瘤学：特性、发病机制、异种移植 微生物学：病毒、细菌 免疫学 药理学 现代医学：;细胞培养的具体应用;细胞培养基本概念;细胞培养的优点;3.应用广：  学科多： 对象广： 各种动物：低等动物--高等动物--人类 一种动物：不同年龄-- 不同组织-- 正常或异常（肿瘤--）;细胞培养的局限性 ;体外培养细胞的分型 ;1、成纤维细胞型： 胞体呈梭型或不规则三角形，中央有卵圆形核，胞质突起，生长时呈放射状。除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间充质起源的组织，如心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮等常呈本型状态。另外，凡培养中细胞的形态与成纤维类似时皆可称之为成纤维细胞。 ;生长特点：排列成放射状，漩涡状，并不紧靠连成片， 细胞—细胞接触易断开而单独行动，游离的单独 　　　的成纤维样细胞，常有几个伸长的细胞突起;2、上皮型细胞： 细胞呈扁平不规则多角形，中央有圆形核，细胞彼此紧密相连成单层膜。生长时呈膜状移动，处于膜边缘的细胞总与膜相连，很少单独行动。起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝、胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。 ;生长特点：易相连成片，相靠—紧密相连—成薄层—铺石状 　　　生长时呈膜状移动，很少脱离细胞群而单个活动 ;3、游走细胞型： 　　呈散在生长，一般不连成片，胞质常突起，呈活跃游走或变形运动，方向不规则。此型细胞不稳定，有时难以和其他细胞相区别。 4、多型细胞型： 　　有一些细胞，如神经细胞难以确定其规律和稳定的形态，可统归??此类。 ;（二）悬浮型： 见于少数特殊的细胞，如某些类型的癌细胞及白血病细胞。胞体圆形，不贴于支持物上，呈悬浮生长。这类细胞容易大量繁殖。 ;概念：培养时不贴附于底物而呈悬浮状态生长 　　　或以机械方法使保持悬浮状态下生长 来源：自血，脾或骨髓，尤以血中白细胞 特点：悬浮生长良好，细胞圆形，单个或小细胞团 优点：生存空间大，提供数量大，传代方便(不需消化)，易于收获，可获得稳定状态 缺点：观察不方便，很多细胞不能悬浮生长(尤以正常细胞) ;培养细胞的生长和增殖过程 ; 动物细胞的体外培养，根本特点是模拟体内的条件，因此，其重要的条件可以概括为无菌、生长环境(PH值、温度)和营养三个方面。;渗 透 压;细胞在体外的生存环境是人工模拟的，除需无菌、温度、空气、PH等条件以外，最主要的是培养基，它是供给细胞营养和保正细胞生长的物质，也是细胞的生存环境。;培养基必须具有下述基本条件：; 1．无菌实验室 2．超净台 3．培养箱和CO2培养箱 4．倒置显微镜 5．液氮罐 6．离心机、摇床 7．手术器械，灭菌、消毒等器具;细胞培养的一般过程 ;准备工作;常用培养器皿及清洗消毒 ;玻璃器皿的清洗 ;橡胶制品清洗;塑料制品的清洗;包装;（一）物理消毒法 （二）化学消毒 （三）抗生素消毒 ;消毒和灭菌;消毒和灭菌;无菌室或超净台的清洁与消毒;培养箱及其他仪器的检查与调试;培养;细胞培养;细胞计数及活力测定 ;MTT法测细胞相对数和相对活力;普通染色观察;培养物的污染及防止 ;污染对培养细胞的影响;细菌污染 ;真菌污染 ;支原体污染 ;污染的预防 ;谢谢！