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磁珠式核酸提取体系 磁粒法核酸提取基本步骤 裂解细胞或病毒颗粒 核酸与磁粒结合 磁分离弃上清 洗涤缓冲液洗涤磁粒 磁分离弃上清 洗脱液将核酸从磁粒洗脱 磁分离弃磁粒，收集上清 磁粒提取试剂操作方式 磁架 磁笔 自动提取仪 自动仪器提取 磁珠提取方法的优化 裂解：裂解液配方，作用时间和温度等 结合：结合液的选择和用量等 洗涤：洗涤液配方等 洗脱：洗脱时间和温度等 主要实验结果 与其他方法或类似商业化试剂盒的比较 核酸提取的灵敏度： HCV RNA，HIV RNA，HBV DNA 与Qiagen 磁珠式核酸提取试剂盒的比较 HCV RNA提取比较 HBV DNA提取比较 提取灵敏度实验 阳性样本梯度稀释 国家灵敏度参考品 HCV RNA提取 HCV RNA国家标准品检测 中检所HBV核酸定量标准品检测 * * 核酸提取的总体要求 高质量：纯度高并且尽可能不破坏核酸 高产量：样本量一定时尽可能提取多的核酸 高通量：同时提取多个标本 自动化：降低劳动量；生物科技的飞速发展，需要处理的核酸样本迅速增多，自动化提取核酸成为一种迫切需要的选择。 磁粒法核酸提取的特点 步骤： 裂解→核酸结合→洗涤→洗脱 特点： 提取时间短 不使用酚、氯仿 用磁分离替代离心分离易于自动化，可以实现高通量提取 目前处于市场发育阶段，是未来发展的方向 主要产品为国外产品：Promega、Roche、Ki