坛紫菜幼苗无性繁殖的再研究-上海海洋大学学报.PDFVIP

第3卷第1-2期 上海水产大学学报 Vo1.3. Nos. 1-2 1994年6月 JOURNAL OF SHANGHAI FISHERIES UNIVERSITY June. 1994 坛紫菜幼苗无性繁殖的再研究 王素娟 马凌波 (上海水产大学水产养殖系. 20Q090) 提 要 坛紫菜 (P旷þhyra haitanensis)幼苗能否形成单抱子是我国多年来悬而来决的理论 问题.本文对这一问题进行了反复、多方面的研究 ，特别是对于幼苗释放细胞的条件，细胞的发育 分化趋势及超微结构作了重点研究，并将研究结果与真正放散单抱子的条斑紫菜(P. yezoensω 作 了比较，发现在一定条件下坛紫菜幼苗能释放一种以前曾被认为是单抱子的细胞 ，它们的光学及 超微结构、释放规律和发育趋势与坛紫菜酶解的蕾养细胞相同，而与条斑紫菜单抱子有明显差异. 试验结果证明坛紫菜幼苗阶段不能产生单泡子。 关键调 坛紫菜，单抱子，游离细胞的培养 坛紫菜盛产于我国闽浙两省，是两大栽培紫菜中产量最高 ，生产面积最多的一种。坛紫菜 生活史中是否存在单抱子，多年来意见不一 。持肯定的理由是养殖紫菜浮筒上长有不少坛紫 菜，因而认为这是人工采苗后的坛紫菜放散单抱子长成的。近年来有的科学工作者报道在坛紫 菜上发现单抱子存在，并可培养成苗[李世英.1988J.但未能说明单抱子生成的条件。早在 60年代，作者针对这 个问题曾进行详细的试验与观察， 由于当时条件限制仅进行了培养与光学 研究，得出了坛紫菜〈刺边紫菜〉没有单抱子的结论〔王素娟、章景荣.1980J。搞清楚坛紫菜生活 史的叶状体阶段有无单抱子，不仅在理论研究上有价值，而且对于生产应用也是非常必要的。 因此现在作者认为有必要在过去研究的基础上进行再研究。试验主要根据以下几方面进行:首 先是显微观察幼苗边缘是否完整来推测是否在释放单抱子 F其次进行幼苗切段再生观察以证 实细胞属蕾养型还是单抱子繁殖型F第三是将这些1-30mm 边缘完整的幼苗加以不同方法处 理后培养观察F最后对释放的游离细胞进行电镜观察院与单抱子结构进行 比较，同时观察其发 育分化趋势。 1 材料与方法 试验采用1993 年10 月17日浙江苍南县人工 养殖约45 d.并于-20C冰箱中冷藏1-2个 月 的 坛紫菜幼苗为材料。试验前2 d 将材料从冰箱中取出漫泡于海水中复苏，挑选1-30mm 的健康 穰体进行研究。 1. 1 材料处理 1994-03-10收到。 1-2期 王素娟、马凌波g坛紫菜幼苗无性繁殖的再研究 9 根据穰体不同饮度分组在显微镜下观察其顶端、边缘及基部细胞情况，发现这些幼苗的顶 0 端及边缘都是完整的，与王素娟 、章景荣[198 J的观察基本相同。我们对穰体进行了以下几种 不同方法的处理和观察。 1. 1. 1 切段再生的观察 将藻体洗刷干净，在含2%抗生素的消毒海水中浸泡24h 后分别对藻体顶端、中部及下端 进行切段培养，观察各段再生情况。 1. 1. 2 幼苗及游离细胞的培养 完整幼苗分3组处理后进行培养。不消毒组只将藻体用消毒海水充分洗刷数次，去除杂藻 及污物，并不灭菌。消毒组将藻体充分用消毒海水洗刷多次后再放入含2%抗生素的消毒海水 中漫泡24h。接种细菌感染组为消毒处理后的事自体接种细菌，进行液体培养。细菌来源是由不 消毒组中出现游离细胞的培养液中分离并接种于Zobell2216海水琼脂培养基上得到的。 细胞培养是待检查试验组穰体产生游离细胞后，用100目尼龙筛绢网过漉培养液分离细胞 并用含1%抗生素的消毒海水离心0000转/m )2m 后弃去上清液，如此冲洗数次后收集细 胞进行培养。将上述游离细胞按一般电镜操作程序进行固定并制作超薄切片，观察其超微结 构。 1.2 培弊条件 藻体切段及完整培养组藻体按大小分数组分别放入直径3cm培养皿中培养。接种细菌感 染组按数