第八篇现代生物制药技术.docVIP

第六章 酶工程制药 一、学习要点： 1、掌握酶的来源和生产，酶纯化的主要方法，固定化酶和细胞的制备方法，酶反应器的基本类型。 2、熟悉酶分离纯化的一般过程，固定化酶的性质和指标，酶反应器的性能评价以及操作。 3、了解酶工程的研究现状、酶工程在制药工业中的应用、治疗性的酶类药物。 二、名词概念 酶工程：是酶学、微生物学的基本原理与化学工程等有机结合而产生的交叉学科。酶工程是利用酶或细胞所具有的特异催化功能，或对酶进行修饰改造，并借助生物反应器和工艺过程来生产人类所需产品的一项技术。其特点是利用酶或含酶细胞作为生物催化剂完成重要的化学反应。 酶：是一类具有催化活性和特殊空间构象的生物大分子物质，包括蛋白质和核酸。 底物：酶参与的化学反应称为酶促反应，被其作用发生化学变化的物质称为底物。 单纯酶：有些酶的组成成分只有蛋白质，其活性取决于它的蛋白质结构，这类酶就属于单纯酶。 结合酶：一些酶除了含有蛋白质外，还有一些小分子即辅助因子，两者结合起来才具有活性，这类酶属于结合酶。 全酶：结合酶的蛋白质部分称为酶蛋白，非蛋白质部分称为辅助因子。只有酶蛋白与辅助因子两部分结合起来组成复合物才能显示催化活性，此复合物称为全酶。 辅基：有些酶的辅助因子是金属离子，有些则是有机小分子。在这些有机小分子中，凡与酶蛋白结合紧密的就称为辅基。 辅酶：与酶蛋白结合得比较松弛，用透析法等可以将其与酶蛋白分开的则称为辅酶。 抽提：是将酶从生物组织或细胞破碎液中以溶解状态最大限度释放出来的过程，可根据目的酶的特点选用不同的溶剂进行抽提。 盐溶：低浓度的中性盐可使蛋白质的溶解度增加，这这一现象叫盐溶。 粗提物：经过细胞破碎和抽提过程，得到含目的酶的无细胞抽提物，常称粗提物。 固定化酶：所谓固定化酶或固定化细胞，是将具有一定生理功能的酶或生物细胞，用物理或者化学方法将其固定，作为固体生物催化剂而加以利用的一种技术。 光偶联法：是以光敏性单体聚合物包埋固定化酶或带光敏性基团的载体共价固定化酶，由于条件温和，可获得酶活力较高的固定化酶。 偶合固定化：是新近发展起来的一种酶固定化方法，是指几种固定化方法或载体的联合使用，即添加稳定因子和促进因子的固定化方法。 无载体固定化：也是一种新的酶固定化技术，是直接利用交联剂交联溶解酶、晶体酶、物理聚集酶和喷雾干燥酶而形成交联溶解酶、交联晶体酶、交联酶聚集体和交联喷雾干燥酶的酶固定化技术。 固定化酶（细胞）的单位：可定义为每毫克干重固定化酶（细胞）每分钟转化底物（或生产产物）的量，表示为μmol（min.mg）。 固定化酶的活力回收：是指固定化后固定化酶（或细胞）所显示的活力占被固定的等当量游离酶（细胞）总活力的百分数。 生物传感器：就是在酶和细胞固定化技术基础上发展起来的分析检测装置。 酶传感器：是由固定化酶与能量转换器（电极、场效应管、离子选择场效应等）密切结合而成的传感装置，是生物传感器的一种，已广泛应用于临床诊断、工业发酵过程控制和环境监测等领域。 酶反应器：用于各种酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。生物反应过程本质上都是酶促反应过程，因此，生物反应器通常即指酶反应器。 膜反应器：是将酶催化反应与半透膜的分离作用组合在一起而成的反应器。 喷射式反应器：是利用高压蒸汽的喷射作用，实现酶与底物的混合，进行高温短时催化反应的一种反应器。 填充床式反应器：是将酶固定化后，填充到柱式反应容器中而制成的一种反应器，适用于固定化酶进行催化反应。 流化床式反应器：是固定化酶颗粒不断地在反应液中悬浮翻动而进行催化反应的一种反应器。 空时：是指底物在反应器中的停留时间，数值上等于反应器体积与底物体积流速之比，又常称为稀释率。 转化率：是指每克底物中有多少被转化为产物。 利用基因工程技术生产酶：是指通过基因工程的DNA重组技术将编码某种酶的基因导入宿主细胞，然后通过培养或发酵宿主细胞大量生产该酶。 突变酶：是指采用基因工程技术对天然酶基因进行剪切、修饰或突变，通过表达修改的基因获得的在酶学性质上符合需要的酶。 酶分子的体外定向进化：是指不需事先了解酶的空间结构和催化机制，而是人为地创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制，在体外对酶基因进行改造，并定向筛选、获得具有某些预期特征的进化酶。 抗体酶：又称催化抗体，是一类免疫系统产生的、具有催化活性的抗体。 前药：又称药物前体，是指某一基团在体外经选择性保护，然后在体内经酶或非酶作用脱去保护基，释放出母体药物而发挥治疗作用的一类药物。 抗体介导前药治疗技术：即是将能水解前药释放出肿瘤细胞毒剂的酶和肿瘤专一性抗体相偶联，这样酶就会通过和肿瘤结合的抗体而存在于细胞的表面，从而提高肿瘤细胞局部药物浓度，增强对肿瘤的杀伤力，达到提高肿瘤化疗效果的目的。 酶的化学修饰：利用化学手段将某些化学物质或基团结