大气压冷等离子体变产1_3_丙_省略_siellapneumoniae_董晓宇.pdfVIP

第 8 卷第 3 期 过 程 工 程 学 报 Vol.8 No.3 2008 年 6 月 The Chinese Journal of Process Engineering June 2008 大气压冷等离子体诱变产 1,3-丙二醇菌株 Klebsiella pneumoniae 1,2 1,3 1 1 董晓宇 ， 李 爽 ， 侯英敏 ， 修志龙 (1. 大连理工大学环境与生命科学学院，辽宁 大连 116024 ；2. 大连大学生物工程学院，辽宁 大连 116622 ； 3. 辽宁师范大学生命科学学院，辽宁 大连 116029) 摘 要：采用大气压冷等离子体介质阻挡放电法对产 1,3-丙二醇的克雷伯氏菌进行诱变，采用诱变与筛选同时进行的 单细胞平板诱变方法，同时获得了可耐受高浓度甘油且 1,3-丙二醇产量较高的优良突变株. 对诱变后菌的间歇发酵结 果表明，诱变菌株比出发菌株 1,3-丙二醇的质量转化率提高了 23% ，对数期比生长速率提高了 18%. 批式流加发酵过 程中，1,3-PD 浓度在发酵 36 h 时达到 70.5 g/L，甘油的质量转化率为 0.57 g/g，分别比野生菌提高47%和 58%. 该诱 变和筛选方法具有操作简单、效率高等特点，对具有工业应用价值的菌株筛选具有实用价值. 关键词：介质阻挡放电；1,3-丙二醇；克雷伯氏菌；诱变 中图分类号：TQ923 文献标识码：A 文章编号：1009−606X(2008)03−0555−06 1 前 言 时的操作程序等优点，而被广泛应用于医疗器械、食品 1,3-丙二醇(1,3-Propanediol, 1,3-PD)是一种重要的 工业、制药、环境等领域的灭菌消毒. Laroussi 等[12]首次 化工原料[1]. 自然界中能够以甘油为底物转化为 1,3-PD 发现在电阻阻挡放电等离子体灭菌的过程中，经等离子 的菌种主要有肠道细菌的克雷伯氏杆菌(Klebsiella 体照射后的 E . coli 对几种底物(L-岩藻糖、D- 山梨醇和 pneumoniae )和产气克雷伯氏菌(Klebsiella aerogene)、乳 D-半乳糖醛酸) 的利用比对照组有显著的提高. 后来Yin 杆菌属的短乳杆菌(Lactobacilli brevis) 和布氏乳杆菌 等[13]报道了经磁化弧光等离子体处理过的番茄种子的 (Lactobacilli buchneri) 、梭菌属的丁酸梭状芽孢杆菌 产量提高了 20.7%. Yu 等[14]在利用介质阻挡放电等离子 (Clostridia butyricum) 和巴氏梭状芽孢杆菌(Clostridia 体杀灭酵母的过程中发现，酵母线粒体琥珀酸脱氢酶的 [2] 活性提高. 上述文献报道说明等离子体对生物体不但具 pasteuianu ) ，其中应用较多的是 Klebsiella pneumoniae . 野生克雷伯氏杆菌发酵甘油生产 1,3-PD 产量低，且不 有杀灭效应，还具有积极的生物学效应. 但大气压冷等 能耐受较高浓度底物. 离子对微生物诱变的研究一直未见报道. 在以上文献和 大气压冷等离子体是一种低温非平衡等离子体，是 实验基础上，本工作采用大气压介质阻挡放电冷等离子 气体在大气压下受到外界高能量(高电压、强电磁场、 体对野生克雷伯氏菌进行诱变，并用较高浓度底物甘油 辐射等)作用时电离产生的常温状态等离子体，电子温 对诱变后的菌进行筛选及驯化. 经等离子体反复诱变和 度在十几个电子伏以